三株海洋高效殺藻菌及其殺藻活性物質(zhì)研究.pdf

1、赤潮是一種嚴(yán)重的全球性海洋災(zāi)害，它會(huì)造成嚴(yán)重的生態(tài)、資源、環(huán)境問題和重大的經(jīng)濟(jì)損失。近年來，赤潮發(fā)生次數(shù)增多，發(fā)生區(qū)域擴(kuò)大，赤潮危害加劇。因此，尋求有效的赤潮防治方法成為當(dāng)務(wù)之急。海洋細(xì)菌在赤潮生消過程中有著極其重要的作用，而細(xì)菌殺藻現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)也為微生物防治赤潮提供了新的可能途徑，“菌藻關(guān)系”研究已經(jīng)成為當(dāng)前赤潮研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。
　　 本論文選取典型有害赤潮藻——塔瑪亞歷山大藻(Alexandrium tamarense)作為

2、主要研究藻種，從東海海域赤潮高發(fā)區(qū)分離篩選到能殺死塔瑪亞歷山大藻的3株海洋殺藻細(xì)菌。研究了這3株殺藻菌的殺藻方式、殺藻譜，并對(duì)它們所分泌的殺藻活性物質(zhì)的性質(zhì)的進(jìn)行了初步研究。本文選取殺藻效果最好的菌株Joostella sp. DH77-1，以殺藻活性為導(dǎo)向從其提取物中分離、純化具有殺藻活性的化合物，并從藻細(xì)胞生理生化指標(biāo)響應(yīng)入手研究其可能的殺藻機(jī)制。主要結(jié)論如下：
　　 1．從東海海域赤潮高發(fā)區(qū)分離并篩選得到3株能殺死塔瑪亞歷

3、山大藻的海洋細(xì)菌，經(jīng)鑒定分屬于Joostella屬，交替單胞菌屬(Alteromonas)，鹽單胞菌屬（Halomonas），其中Joostella屬是擬桿菌門(Bacteroidetes)，黃桿菌科(Flavobacteriaceae)2008年發(fā)現(xiàn)的新成員。因此，菌株DH77-1也是Joostella屬首次發(fā)現(xiàn)的殺藻細(xì)菌。
　　 2．菌株DH77-1的殺藻作用方式是間接殺藻。菌株DHQ19，DH46兩株菌可能兼顧直接殺藻和間

4、接殺藻兩種方式。菌株DHQ19屬于鹽單胞菌屬（Halomonas），這是該屬細(xì)菌直接殺藻的首次報(bào)道。這3株殺藻細(xì)菌的殺藻作用具有不同程度的種屬特異性。
　　 3．這3株殺藻細(xì)菌產(chǎn)生的殺藻活性物質(zhì)都具有較好的熱穩(wěn)定性，對(duì)酸、堿都相對(duì)穩(wěn)定，紫外照射處理和鉛鹽處理也對(duì)其殺藻活性物質(zhì)的影響不大，但在反復(fù)凍融處理后，殺藻活性物質(zhì)的活性微有下降。它們的殺藻活性物質(zhì)可能是小分子物質(zhì)，且極性較高。此外，還研究了這3株海洋殺藻菌無菌濾液的凍干粉殺

5、藻效果，與無菌濾液相比，凍干粉的殺藻效果基本沒有變化。因此，我們可以用凍干粉的形式對(duì)其進(jìn)行保存，或進(jìn)一步開發(fā)環(huán)保殺藻劑。
　　 4．以殺藻活性為導(dǎo)向從菌株Joostella sp. DH77-1發(fā)酵液的提取物中分離純化殺藻化合物，初步確定其分子量約為125.88，近一步的純化鑒定工作仍在進(jìn)行中。
　　 5．在海洋殺藻細(xì)菌DH77-1殺藻活性成分脅迫下，塔瑪亞歷山大藻細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)自我防御體系積極響應(yīng)，細(xì)胞總蛋白含量顯著