蘋(píng)果中典型農(nóng)藥殘留對(duì)人體生物可給性的體外研究.pdf

1、本文以蘋(píng)果中己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑以及甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯5種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留為對(duì)象，建立了蘋(píng)果中供試農(nóng)藥在模擬胃液以及腸液中的多殘留分析方法；運(yùn)用體外胃腸模擬法研究了蘋(píng)果中供試農(nóng)藥殘留生物可給性的影響因素，包括模擬胃液以及腸液中的消化時(shí)間、固液比、pH值等；并基于生物可給性的結(jié)果，探討了蘋(píng)果中供試農(nóng)藥殘留的食用安全性。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　1、蘋(píng)果中典型農(nóng)藥在模擬胃腸液中多殘留分析

2、方法的建立
　　蘋(píng)果中的己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑以及甲氰菊酯等5種擬除蟲(chóng)菊酯在模擬胃腸液中均用乙腈為提取溶劑，超聲提取30 min，弗羅里硅土SPE柱凈化，己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑的淋洗劑為乙腈20 ml，擬除蟲(chóng)菊酯的淋洗劑為20 ml石油醚:乙酸乙酯（95:5，V/V）均分兩次淋洗，GC-ECD進(jìn)行檢測(cè)。添加回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在0.1~1.0 mg/kg的添加濃度范圍內(nèi)，己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑在模擬腸液中的平均添加回收率

3、分別為74.55％~107.32%、72.45%~76.48%和74.89%~105.55%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)分別為2.03%~4.94%、0.68%~3.42%和0.69%~3.91%；在模擬胃液中的平均添加回收率分別為108.61%~115.35%、84.54%~104.37%和105.80%~115.55%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（ RSD)分別為1.46%~2.94%、2.29%~5.12%和1.89%~4.35%。在添加濃度為0.

4、01~1.0 mg/kg的范圍內(nèi)，甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯在模擬腸液中的平均添加回收率分別為81.98%~104.55%、73.00%~107.85%、83.21%~107.69%、72.70%~112.79%和81.46%~98.90%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（ RSD)分別為2.18%~6.44%、3.24%~6.54%、3.98%~7.72%、3.62%~6.91%和3.63%~7.25%；在模擬胃液中的平

5、均添加回收率分別為83.15%~102.97%、80.36%~102.66%、95.05%~105.01%、88.73%~106.96%和87.31%~100.10%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)分別為2.32%~4.32%、2.46%~4.11%、1.53%~6.21%、2.11%~4.10%和1.28%~5.10%。該方法的準(zhǔn)確性和精確度均滿(mǎn)足農(nóng)藥殘留分析的要求。
　　2、模擬胃液中不同因素對(duì)蘋(píng)果中典型農(nóng)藥的生物可給性影響
　

6、　研究了固液比、消化時(shí)間、pH值等不同因素對(duì)蘋(píng)果中供試農(nóng)藥在模擬胃液中生物可給性的影響。結(jié)果表明：蘋(píng)果中供試農(nóng)藥在模擬胃反應(yīng)階段中，當(dāng)固液比為0.05時(shí)，己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑以及5種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥的生物可給性分別為57.27%、79.94%、93.49%、31.22%、28.46%、24.15%、27.64%和21.68%。在模擬胃反應(yīng)階段中蘋(píng)果中供試農(nóng)藥的生物可給性與固液比呈對(duì)數(shù)的關(guān)系。隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，模擬胃液中的生物可給

7、性的變化不明顯，己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑以及5種擬除蟲(chóng)菊酯平均生物可給性分別為72.99%、27.44%、57.36%、20.06%、29.54%、19.03%、22.02%和24.01%。pH值會(huì)影響供試農(nóng)藥的生物可給性，己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑在pH值為2.12時(shí)生物可給性最大，分別達(dá)到80.00%、28.06%和64.06%；5種供試擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥在pH為1.91時(shí)生物可給性最大，分別為7.43%、8.84%、9.73%、1

8、1.46%、9.95%。
　　3、模擬腸液中不同因素對(duì)蘋(píng)果中典型農(nóng)藥的生物可給性影響
　　探討了pH值、消化時(shí)間、固液比等對(duì)蘋(píng)果中供試農(nóng)藥在模擬腸液中生物可給性的影響。結(jié)果表明：在模擬腸液中pH值的不同會(huì)影響供試農(nóng)藥的生物可給性，當(dāng)pH值為7.01時(shí)，己唑醇和苯醚甲環(huán)唑的生物可給性達(dá)到最大分別為56.34%和60.86%，而螺螨酯的生物可給性達(dá)到最大26.16%時(shí)的pH值為6.59；在pH為7.26時(shí)高效氯氰菊酯、氰戊菊酯、

9、溴氰菊酯的生物可給性均達(dá)到最大，分別為16.39%、14.73%和18.63%；而當(dāng)pH為8.35時(shí)甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的生物可給性達(dá)到最大分別為19.70%和17.36%。消化時(shí)間的不同對(duì)己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑的生物可給性有一定影響，在3.5 h時(shí)三種農(nóng)藥的生物可給性達(dá)到最大分別為88.45%、68.75%和113.43%,而模擬腸液中消化時(shí)間的不同對(duì)5種擬除蟲(chóng)菊酯生物可給性影響不顯著；模擬腸反應(yīng)階段中，當(dāng)固液比為0.05時(shí)，

10、己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑以及5種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥的生物可給性分別為63.76%、70.17%、103.52%、35.63%、34.53%、28.95%、31.58%和25.90%，通過(guò)數(shù)據(jù)擬合發(fā)現(xiàn)在固液比為0.05~0.75之間時(shí)，蘋(píng)果中供試農(nóng)藥的生物可給性與固液比呈對(duì)數(shù)的關(guān)系且R2均在0.93以上。
　　4、蘋(píng)果中供試農(nóng)藥在食用過(guò)程中的安全性評(píng)價(jià)
　　生物可給濃度即樣品中污染物的含量與生物可給性的乘積，計(jì)算公式w(生物可

11、給濃度, mg/kg)=w(樣品中化合物的含量, mg/kg)×生物可給性。本實(shí)驗(yàn)以供試農(nóng)藥在蘋(píng)果中的最低殘留限量為樣品化合物的含量，在固液比為0.1 g/ml，模擬胃液以及腸液消化時(shí)間分別為2h和4h的條件下計(jì)算得出己唑醇、螺螨酯、苯醚甲環(huán)唑、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯的生物可給濃度分別為0.0704 mg/kg、0.0828 mg/kg、0.1465 mg/kg、0.3654 mg/kg、0.0106

12、 mg/kg、0.0665 mg/kg、0.0100 mg/kg、0.0025 mg/kg。供試農(nóng)藥的ADI值比較發(fā)現(xiàn)，高效氯氟氰菊酯和高效氯氰菊酯均為20μg/kg·d，其慢性毒性大小相近，而以蘋(píng)果中兩種農(nóng)藥的最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)作為攝入濃度計(jì)算，高效氯氟氰菊酯的生物可給濃度為0.0106mg/kg，遠(yuǎn)低于高效氯氰菊酯的0.0665mg/kg，僅為其1/6，因此就蘋(píng)果中這兩種農(nóng)藥殘留對(duì)人體的健康風(fēng)險(xiǎn)而言，高效氯氟氰菊酯比高效氯氰菊酯更安全