基于抗生素分離-富集和分析的新方法及應(yīng)用研究.pdf

1、抗生素目前被廣泛用于養(yǎng)殖業(yè)中，濫用情況日益嚴(yán)重。由于不能完全被機(jī)體吸收，抗生素以原形或其代謝物形式經(jīng)由畜禽糞尿排入環(huán)境，經(jīng)不同途徑對(duì)土壤和水體造成污染，直接或間接地嚴(yán)重威脅人類健康和生態(tài)平衡。食品安全和環(huán)境保護(hù)越來越受到人們的高度關(guān)注，迫切需要發(fā)展高效率、高選擇性和高靈敏度的抗生素殘留分離/富集和分析方法，提供可靠有效的監(jiān)測數(shù)據(jù)。
　　 本課題旨在利用雙水相氣浮溶劑浮選、電荷轉(zhuǎn)移分光光度法和分子印跡等新技術(shù)手段分離/富集和檢測食

2、品和環(huán)境中的多種抗生素，為研究抗生素殘留檢測奠定理論和實(shí)踐基礎(chǔ)，為這些技術(shù)手段拓展新的方向。主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下：
　　 1.進(jìn)行了異丙醇/K2HPO4雙水相氣浮溶劑浮選體系下分離富集環(huán)境水樣中殘留的羅紅霉素的研究，建立了硫酸顯色法測定富集后的羅紅霉素。最佳的浮選條件為：浮選溶劑為異丙醇5 ml，分相鹽K2HPO4的濃度為48％(g/100 ml)，pH值為9.0，浮選池體積為50 ml，氣體流速15 ml/min，浮選時(shí)間3

3、0 min。在此條件下的浮選率達(dá)到93％，富集倍數(shù)9.3。通過對(duì)環(huán)境水樣的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，浮選率達(dá)到90％以上。并與雙水相萃取進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，證明溶劑浮選法更佳。
　　 2.研究了正丙醇/(NH4)2SO4雙水相氣浮溶劑浮選分離/富集環(huán)境水樣中殘留替米考星的方法，建立了替米考星的HPLC測定方法，最佳浮選條件為：浮選溶劑為正丙醇5 ml，分相鹽(NH4)2SO4濃度為36％(g/100 ml)，pH為3，浮選池體積為100 ml，氣

4、體流速為20 ml/min，浮選時(shí)間30 min。在最佳條件下浮選率為84％，富集倍數(shù)16.8。與雙水相萃取相比，雙水相浮選富集倍數(shù)高，處理水樣體積大，正丙醇用量少，無乳化現(xiàn)象。適于環(huán)境殘留抗生素的分析。
　　 3.以紫外分光光度法為手段，研究了電子給體羅紅霉素(roxithromycin)與電子受體碘(I2)之間的電荷轉(zhuǎn)移反應(yīng)，確定了反應(yīng)的最佳條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：羅紅霉素與碘在乙醇溶液中室溫下即可生成穩(wěn)定的1:1.5型絡(luò)合物，

5、λmax=290，360 nm，羅紅霉素濃度在2～500 mg/L范圍內(nèi)服從比耳定律，用建立的方法測定膠囊、分散片中的羅紅霉素含量，結(jié)果與藥典方法一致，回收率為96.2％～101.94％。
　　 4.建立了亞甲基藍(lán)電荷轉(zhuǎn)移光度法測定紅霉素的新方法。以二次石英蒸餾水為溶劑，紅霉素與亞甲基藍(lán)在常溫下進(jìn)行電荷轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成1:1穩(wěn)定的絡(luò)合物，最大吸收波長為678 nm。此法靈敏度高(e=1.59×104L/(mol·cm))，精密度較好

6、(在25ml溶液中測定5.0×103 mg/ml紅霉素9次，RSD=3.0％)。紅霉素的濃度在0.0008～0.0250 mg/ml范圍內(nèi)服從Beer定律，方法的檢出限為0.11μg/ml。探討了反應(yīng)機(jī)理，其中紅霉素作為電子給予體、亞甲基藍(lán)作為電子接受體發(fā)生了荷移反應(yīng)。方法可靠，重現(xiàn)性好，可用于紅霉素腸溶片和獸用紅霉素含量測定。
　　 5.采用沉淀聚合法制備了加替沙星分子印跡聚合物。采用掃描電鏡對(duì)制備所得的分子印跡聚合物進(jìn)行了表

7、征。采用紫外分光光度法和紅外光譜法對(duì)分子印跡聚合物的吸附性能進(jìn)行了研究；結(jié)果表明，通過沉淀聚合法制備得到分子印跡聚合物微球，粒徑大約在0.4μm左右。制備工藝比較簡單省時(shí)，與封管聚合法相比，省卻了研磨，篩分等繁瑣的后處理工序。
　　 6.利用表面分子印跡技術(shù)在硅介孔材料SBA-15上制備替米考星分子印跡聚合物。用拉曼光譜和掃描電鏡表征。利用吸附平衡實(shí)驗(yàn)研究了聚合物對(duì)替米考星的吸附性能，結(jié)果表明制備的印跡聚合物吸附速度快，吸附容量

8、大。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，聚合物對(duì)替米考星的吸附平衡和動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)分別符合Freundlich等溫線模型和Pseudo-second-order動(dòng)力學(xué)模型。該聚合物可用于環(huán)境殘留替米考星分離和富集。
　　 7.以硅烷化的SBA-15為載體材料，合成替米考星表面分子印跡聚合物，將該印跡聚合物作為固相萃取填料來吸附水樣中的替米考星。對(duì)固相萃取過程中的上樣溶劑、洗脫溶劑、洗脫次數(shù)等條件進(jìn)行了優(yōu)化選擇，同時(shí)，測定環(huán)境樣品中的替米考星。結(jié)果表明