7-羥乙基槐角苷的半合成及其性能評價.pdf

1、槐角資源豐富，具有多種藥理活性，尤其其中的槐角苷具有弱雌激素樣作用，對治療骨質(zhì)疏松甚有療效。但由于槐角苷水溶性差、生物利用度低，限制了其臨床應(yīng)用。為改善其溶解性，本研究采用選擇性提取方法制備槐角苷單體，然后對提取物進(jìn)行化學(xué)修飾合成7-羥乙基槐角苷，并采用物理、化學(xué)和動物實驗的方法對其性能進(jìn)行初步評價。主要結(jié)果如下:
　　(1)槐角苷的制備
　　提取工藝研究，以槐角苷得率和含量為指標(biāo)，通過單因素和正交實驗得出:槐角苷最佳提取工

2、藝條件為，70％乙醇、時間2.5 h、溫度80℃、液料比7∶1(mL/g);提取物中槐角苷得率為2.0％，含量76％。
　　純化采用樹脂純化-溶劑重結(jié)晶工藝。樹脂篩選實驗表明，在HYP-501、HPD-100、D101、D201、AB-8五種樹脂中，D101樹脂對槐角苷的吸附和解吸性能最佳，優(yōu)化后的操作參數(shù):D101樹脂，提取液上柱濃度2 mg/mL，速度2 BV/h;80％乙醇洗脫，洗脫流速2 BV/h;所得中間品純度在85％以

3、上。中間品經(jīng)乙醇重結(jié)晶，所得產(chǎn)品經(jīng)理化鑒別、IR、1H-NMR、13C-NMR測定，結(jié)果與染料木素-4'-O-β-D-葡萄糖（genistein-4'-O-β-D-glucoside）一致;用HPLC檢測，槐角苷含量為95.3％。
　　(2)7-羥乙基槐角苷的合成
　　研究以Williamson反應(yīng)為理論指導(dǎo)，吸附柱分離方法精制。通過單因素實驗得出，以含量90％以上的槐角苷為原料，2-氯乙醇為羥乙基化試劑，純化水為溶劑，氫氧

4、化鈉為催化劑，可以合成目標(biāo)產(chǎn)物。響應(yīng)面分析實驗得出，堿用量3.2％（w/v相對溶劑）、溶劑用量1∶50（w/v相對槐角苷）、反應(yīng)溫度80℃、反應(yīng)時間4h為7-羥乙基槐角苷較好的合成條件，較好的收率為43.34％（粗品）。所得粗品，用硅膠柱層析，乙酸乙酯∶甲醇(6∶1)洗脫，收集Rf值為0.45的洗脫液，旋蒸，揮干，得淡黃色固體物質(zhì);經(jīng)與槐角苷UV、IR、1H-NMR、13C-NMR對比測定，結(jié)果證實，合成產(chǎn)物為7-羥乙基槐角苷。

5、　　(3)7-羥乙基槐角苷的性能評價
　　溶解性測定得出，槐角苷和7-羥乙基槐角苷，37℃的平衡溶解度分別為17.74 mg/L、20.35 mg/L，油水分配系數(shù)分別為376.52、359.88。
　　清除自由基實驗得出，在2～15μg/mL范圍內(nèi)，槐角苷和7-羥乙基槐角苷清除自由基的能力均呈量效正相關(guān)性。當(dāng)樣品濃度為15μg/mL時，槐角苷和7-羥乙基槐角苷對·O2-、DPPH、·OH的清除率分別為25.18％、17.4

6、4％、27.53％和28.32％、20.32％、28.98％。
　　消腫實驗得出，按4 mg/(kg·day)灌胃給藥，槐角苷和7-羥乙基槐角苷對二甲苯所致小鼠耳廓、甲醛所致足腫脹的抑制率分別為22.98％、19.61％和26.93％、22.13％。
　　弱雌激素樣作用實驗得出，按4 mg/(kg· day)灌胃給藥，槐角苷和7-羥乙基槐角苷組的子宮系數(shù)、卵巢系數(shù)分別為0.180％、0.096％和0.195％、0.106％。