水產(chǎn)品中三聚氰胺的HPLc-MS法檢測及殘留規(guī)律研究.pdf

1、本研究以我國主要養(yǎng)殖水產(chǎn)品金鯧魚(Trachinotus blocht)、羅非魚(Tilapia)、凡納濱對蝦(Penaeus vannamei)及其飼料為原料。通過對前處理方法、色譜條件和質(zhì)譜條件的優(yōu)化等方面的研究，建立了水產(chǎn)品及其飼料中三聚氰胺的HPLC-MS檢測方法并研究了三聚氰胺在凡納濱對蝦體內(nèi)的殘留消除規(guī)律。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1、水產(chǎn)品中三聚氰胺的DSPE-HPLC-MS檢測方法研究
　　建立水產(chǎn)品中三

2、聚氰胺的分散固相萃取-高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法(DSPE-HPLC-MS)。樣品用甲醇、pH4.5的乙酸銨緩沖溶液提取，分散固相萃取凈化。經(jīng)Thermo Fisher Hypersil Gold C18柱(150 mm×2.1 mm，5μm)分離，選擇反應(yīng)監(jiān)測(SRM)負(fù)離子模式測定。結(jié)果表明：三聚氰胺含量在5.0～50.0 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R2=0.9999，方法檢出限(S/N=3)為0.01 mg/kg，方法加標(biāo)回

3、收率為82.8％～100.4％，RSD均小于5.0％，適合檢測水產(chǎn)品中的三聚氰胺含量。
　　2、水產(chǎn)飼料中三聚氰胺的HPLC-MS檢測方法研究
　　通過對提取液的選擇、凈化方式的優(yōu)化和色譜柱的選擇，建立了水產(chǎn)飼料中三聚氰胺的HPLC-MS法。樣品經(jīng)乙腈水溶液(V：V，70:30)超聲提取，離心后取上清液與等體積乙腈混勻二次沉淀蛋白，冷凍離心后直接過濾膜即可上機測定。經(jīng)WatersAtlantis HILIC Silica(1

4、50 mm×2.1 mm，5μm)分離，選擇反應(yīng)監(jiān)測(SRM)負(fù)離子模式掃描。結(jié)果表明：在三聚氰胺含量為5.0～50.0 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R2=0.9996，方法最低檢出限(S/N=3)為0.01 mg/kg，加標(biāo)回收率為91.7％～98.5％，RSD均小于5.0％。樣品前處理方法簡便，凈化效果好，準(zhǔn)確度和精密度高，可用于水產(chǎn)飼料中三聚氰胺含量的測定。
　　3、凡納濱對蝦中三聚氰酸的HPLC-MS檢測方法研究

5、　　凡納濱對蝦樣品經(jīng)0.1％甲酸甲醇溶液提取用二甘醇破乳離心后取上清液過濾膜后直接上機測定。結(jié)果表明：三聚氰酸在5.0～50.0 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為R2=0.9998，最低檢出限(S/N=3)為0.01 mg/kg，加標(biāo)回收率為82.3％～101.4％，RSD均小于10.0％，適合于凡納濱對蝦體內(nèi)的三聚氰酸含量檢測。
　　4、三聚氰胺在凡納濱對蝦體內(nèi)的殘留和消除規(guī)律研究
　　模擬凡納濱對蝦養(yǎng)殖過程，在室

6、溫(23℃～29℃)條件下，凡納濱對蝦用普通飼料馴化7 d后再用不同劑量的含有三聚氰胺的飼料連續(xù)投喂25 d，研究三聚氰胺在凡納濱對蝦血液、肌肉和肝胰腺組織中的殘留消除規(guī)律。結(jié)果表明：飼料中添加三聚氰胺對凡納濱對蝦的體重有顯著影響(P<0.05)，對飼料系數(shù)沒有顯著影響(P>0.05)。投喂含有三聚氰胺的飼料，三聚氰胺在對蝦血液、肌肉和肝胰腺組織中均有殘留，當(dāng)飼料三聚氰胺含量為800 mg/kg時，對蝦中三聚氰胺殘留量最高部位是肝胰腺，