三聚氰胺在羅非魚中的殘留及消除規(guī)律研究.pdf

1、本文建立了水產(chǎn)飼料和水產(chǎn)品中三聚氰胺的檢測方法,對廣東省湛江市各大水產(chǎn)品市場的對蝦和羅非魚及幾家飼料生產(chǎn)企業(yè)的飼料進行本底含量的調查檢測,研究了三聚氰胺在羅非魚中的殘留及消除規(guī)律。研究結果如下:
　　 1.對水產(chǎn)飼料中三聚氰胺的高效液相色譜(HPLC)檢測方法進行了優(yōu)化。
　　 根據(jù)三聚氰胺的吸收光譜、化學結構等理化性質,對流動相組成比例、流速、pH等因素進行了優(yōu)化,建立了三聚氰胺高效液相色譜檢測方法:DIKMAC18(

2、250mm×4.6mm,5μm)；流動相為乙腈:離子對試劑溶液=8:92(v/v)；流速為1.2mL/min；檢測波長:236nm；柱溫:40℃；出峰時間為15.58min。
　　 飼料樣品前處理:樣品經(jīng)酸性乙腈-水超聲提取,二氯甲烷反萃取后,上清液用固相萃取小柱凈化,用高效液相色譜儀測定,外標法定量。結果:三聚氰胺在0.2～10 mg/L濃度范圍內呈線性相關,相關系數(shù)R2=0.9995。加標水平在1.0～10mg/kg時,回收

3、率為85.5％～93.6％,測定的相對標準偏差為1％～2％,最低檢出限為0.2 mg/kg。
　　 2.建立了水產(chǎn)品中三聚氰胺的高效液相色譜(HPLC)快速檢測方法
　　 根據(jù)水產(chǎn)品原料基質的特點,對水產(chǎn)品的樣品前處理過程進行優(yōu)化。
　　 水產(chǎn)品樣品前處理:以羅非魚和南美白對蝦為實驗對象,樣品采用50％甲醇水+1％三氯乙酸(3+1)震蕩提取,于5000r/min的離心機上離心10min,取上清液2mL轉移至2mL

4、離心管中,于8000r/min的高速離心機離心8min。取上清液過0.2μm濾膜上機測定。結果:本方法省去了固相萃取柱凈化的步驟,三聚氰胺在0.2～10.0ug/mL濃度范圍內線性關系良好,相關系數(shù)0.9989,加標水平在0.5～10mg/kg范圍內,回收率為85％～91％,相對標準偏差1％～2％,方法的檢出限為0.5mg/kg。
　　 3.采用所建立的水產(chǎn)飼料及水產(chǎn)品中三聚氰胺的檢測方法,對湛江市各大水產(chǎn)品市場的對蝦和羅非魚及

5、幾家飼料生產(chǎn)企業(yè)的飼料進行本底含量的調查檢測。檢測結果顯示:在已檢測的樣品中,水產(chǎn)品中未檢出三聚氰胺,配合飼料中檢出率為4.3％,飼料原料中檢出率為4.5％。高蛋白飼料生產(chǎn)加工過程中存在人為添加三聚氰胺的可能,水產(chǎn)品中三聚氰胺本底值在允許范圍內。
　　 4.模擬羅非魚養(yǎng)殖過程,對三聚氰胺在羅非魚肌肉和內臟中的殘留消除規(guī)律進行了研究。試驗采用單因子試驗設計,300尾體重為10～12g的羅非魚隨機分5組,每組60尾。各組分別飼喂添加

6、0mg/kg,1000mg/kg(0.1％),5000mg/kg(0.5％),10000mg/kg(1％),50000mg/kg(5％)三聚氰胺的飼料。試驗期為50天,每隔5天各組隨機抽取3尾后稱重,并采集肌肉和內臟,分別測定其中的三聚氰胺殘留量。在第10次采樣結束后,對各組羅非魚均改投空白飼料,試驗期為10天,各組每天隨機抽取3尾后稱重,并采集肌肉和內臟,分別測定其中的三聚氰胺殘留量。結果表明:(1)飼料中添加不同濃度的三聚氰胺對各組

7、羅非魚的平均體重增長無顯著影響(P>0.05)；(2)內臟和肌肉中三聚氰胺的殘留量隨著各實驗組飼料中添加量的增加呈顯著遞增趨勢(P<0.05),低劑量組(1000、5000 mg/kg)的內臟和肌肉中的殘留量在2～20mg/kg間,高劑量組(10000、50000 mg/kg)的殘留量均超過40mg/kg,各組中內臟的殘留量均顯著高于肌肉(P<0.05)。停藥5天后,羅非魚的內臟和肌肉中三聚氰胺的含量均內顯著下降,各實驗組的三聚氰胺殘留