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文檔簡介
1、氧載體肌紅蛋白(Myoglobin,Mb)由153個氨基酸和一個血紅素(heme)輔基組成,具有分子量小、穩(wěn)定性高、易通過基因工程和蛋白質(zhì)工程獲得高純度蛋白等優(yōu)點,長期以來備受研究者的青睞,廣泛作為蛋白質(zhì)分子框架,用來研究蛋白質(zhì)特別是血紅素蛋白結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系。為了研究血紅素活性中心谷氨酸以及組氨酸對肌紅蛋白結(jié)構(gòu)以及功能的影響,我們通過在血紅素活性中心遠端29位和43位分別引進谷氨酸(Glu29)和組氨酸(His43),即突變型肌紅蛋白L
2、29E/F43H Mb,后者形成了一個遠端氫鍵網(wǎng)絡(luò),使肌紅蛋白形成了雙組氨酸配位結(jié)構(gòu),64位(His64)和93位組氨酸(His93)。
本論文以L29E/F43H為重點研究對象,以野生型WT Mb以及F43HMb和L29E Mb單突變體作為對照,結(jié)合X射線晶體學(xué)、氟離子結(jié)合動力學(xué)、活化過氧化氫能力等研究,來探索血紅素活性中心谷氨酸以及組氨酸對肌紅蛋白結(jié)構(gòu)及功能的影響。研究結(jié)果表明,血紅素活性中心的氫鍵網(wǎng)絡(luò),不僅可以調(diào)控血紅素
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