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文檔簡介
1、目的:探討沉默Dock180對缺氧/復氧誘導的心肌細胞凋亡和生存力的影響及其機制。
方法:分別用空白試劑、陰性慢病毒、Dock180 RNAi慢病毒(沉默Dock180 mRNA)感染H9C2心肌細胞,并進行缺氧/復氧(H/R)干預。實驗分為空白組,陰性病毒組,Dock180沉默組,空白+H/R組,陰性病毒+H/R組,Dock180沉默+H/R組。RT-PCR法檢測心肌細胞的Dock180 mRNA的表達;蛋白質(zhì)印跡分析法檢測
2、心肌細胞Dock180蛋白和p-ERK1/2蛋白表達;MTT法檢測心肌細胞的增殖率;流式細胞術(shù)(FCM)檢測心肌細胞的凋亡率;共聚焦激光掃描顯微鏡(CLSM)觀察心肌細胞骨架變化。
結(jié)果:Dock180沉默組較空白組和陰性病毒組,Dock180沉默+H/R組較空白+H/R組和陰性病毒+H/R組Dock180 mRNA、Dock180蛋白、p-ERK1蛋白、p-ERK2蛋白、增殖率均出現(xiàn)降低(P<0.01),凋亡率均增加(P<0
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