馬乳酒樣乳桿菌ZW3合成EPS條件的優(yōu)化及結(jié)構(gòu)的初步分析.pdf

1、乳酸菌產(chǎn)生的胞外多糖己成為研究的熱點(diǎn)，它被公眾認(rèn)為是安全的，綠色的，它在發(fā)酵食品的持水力、質(zhì)構(gòu)、口感方面起了重要作用，而且乳酸菌胞外多糖的保健功能也是有目共睹，如:降低膽固醇、抗過(guò)敏、抗腫瘤、抑菌、消炎、調(diào)節(jié)免疫等，新型乳酸菌胞外多糖的開(kāi)發(fā)已成為工業(yè)微生物研究的熱點(diǎn)之一。
　　本研究首先對(duì)實(shí)驗(yàn)室分離的一株高產(chǎn)EPS的馬乳酒樣乳桿菌（Lactobacilluskefiranofaciens，Lb.kefiranofaciens）進(jìn)行

2、了培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的優(yōu)化，最終確定最佳培養(yǎng)基組分為:葡萄糖濃度1.6％、乳糖濃度0.4％、酵母浸粉濃度4.5％、磷酸氫二鉀濃度0.18％，硫酸錳濃度0.02％，氯化鈉濃度0.01％，半胱氨酸鹽酸鹽濃度0.1％，乙酸鈉濃度1.5％，吐溫-80濃度0.1％;最佳培養(yǎng)條件為:初始pH值6.2，接種量3％，培養(yǎng)方式為30℃厭氧靜置培養(yǎng)，發(fā)酵時(shí)間60 h。
　　然后對(duì)Lb.kefiranofaciens ZW3在改良培養(yǎng)基所合成的EPS進(jìn)行

3、了分離純化，使用TCA法除蛋白，然后用Q-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-4B層析柱進(jìn)行了純化。純化后經(jīng)全波長(zhǎng)掃描和高效液相色譜進(jìn)行了純度鑒定，其純度可達(dá)93.1％。
　　最后對(duì)純化后的EPS進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析，并對(duì)改良培養(yǎng)基和乳清培養(yǎng)基發(fā)酵產(chǎn)生的EPS進(jìn)行了比較。氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用結(jié)果顯示，這兩種EPS均由甘露糖、葡萄糖和半乳糖構(gòu)成，但所占比例有較大的差別。高碘酸氧化和Smith降解結(jié)果顯示，改良培養(yǎng)