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1、目的:本研究的目的是探討白藜蘆醇(Resveratrol)對(duì)超極化激活環(huán)核苷酸門控陽離子通道(hyperpolarization—activated cyclic nucleotide—gated cation channel,HCN)基因家族亞型HCN4參與編碼的超極化激活的陽離子通道電流(If)的影響,并試圖鑒定其作用位點(diǎn),探討作用機(jī)制。
方法:提取HCN4質(zhì)粒DNA,并體外轉(zhuǎn)錄成mRNA,之后將轉(zhuǎn)錄好的mRNA表達(dá)在
2、非洲爪蟾卵母細(xì)胞上,并使用標(biāo)準(zhǔn)的雙電極電壓鉗技術(shù)研究。
結(jié)果:HCN4參與編碼的超極化激活的陽離子通道電流被白藜蘆醇的抑制具有濃度和電壓依賴性(半最大抑制濃度[IC50值]=83.75 umol/L)。穩(wěn)態(tài)激活和失活參數(shù)在160umol/L的白藜蘆醇存在時(shí)向更正的方向移動(dòng)。狀態(tài)依賴性的測(cè)試中,發(fā)現(xiàn)電壓依賴性If的封鎖發(fā)生迅速。在本實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn),10nmol/L異丙腎上腺素對(duì)HCN4參與編碼的超極化激活的陽離子通道電流具
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