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1、秸稈主要由木質(zhì)素、纖維素及半纖維素組成,是一種重要的可再生能源物質(zhì)。木質(zhì)素通過(guò)共價(jià)鍵與半纖維素結(jié)合形成木質(zhì)素鞘,將纖維素分子包埋在其中,形成一種堅(jiān)固的天然屏障,隔離了纖維素分子與外界的酶的接觸。因此秸稈的開(kāi)發(fā)利用的關(guān)鍵就是如何高效短時(shí)的降解秸稈中木質(zhì)素。
本論文優(yōu)化了米曲霉 CGMCC5992液態(tài)發(fā)酵合成木質(zhì)素過(guò)氧化物酶的工藝條件以及以糖得率為指標(biāo)優(yōu)化了發(fā)酵液催化過(guò)氧化氫氧化降解秸稈的工藝條件,并且分析了不同環(huán)境因素對(duì)該反應(yīng)的
2、作用機(jī)理。主要結(jié)論如下:
?。?)利用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化了米曲霉合成木質(zhì)素過(guò)氧化物酶的最佳培養(yǎng)基組成:玉米秸稈30 g/L,葡萄糖4.6 g/L,硝酸鈉1.2 g/L,玉米漿1 g/L,酵母浸膏1.2 g/L,VB10.15 g/L。在此條件下,最高的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶酶活達(dá)到652.34 U/L。
?。?)以糖得率作為制備指標(biāo),通過(guò)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì)提高了以米曲霉CGMCC5992發(fā)酵液作為催化劑,過(guò)氧化氫氧
3、化降解木質(zhì)素的能力。優(yōu)化后得到的過(guò)氧化氫氧化降解木質(zhì)素的條件為:113℃預(yù)處理11 min的玉米秸稈20 g、粗酶液50 mL、1.5%H2O280 mL、H2O2流速0.4 mL/min、水240 mL(水:物料12:1),水解溫度39℃,時(shí)間8 h,最大產(chǎn)糖得率達(dá)到46.28%。
(3)通過(guò)DEAE-纖維素DE-52的離子層析柱和膜過(guò)濾多次反復(fù)分離純化,獲得了分子量為18.2 KDa的木質(zhì)素過(guò)氧化物酶。以反應(yīng)速率對(duì)底物濃度
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