基于新型納米材料的免標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光免疫分析策略檢測(cè)生物標(biāo)志物.pdf

1、在人體的許多重要的生命過程中，鐵都是必不可少的元素之一，如氧運(yùn)輸、電子傳遞、氧化還原反應(yīng)、細(xì)胞分化和生長(zhǎng)等過程，均需要鐵的參與。轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)是人體血液中結(jié)合鐵元素的主要單體糖蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵到需要鐵的細(xì)胞，其在人血漿中含量約在2-4 mg mL-1。肝炎、貧血和妊娠的出現(xiàn)往往會(huì)導(dǎo)致TRF濃度水平的上升，而腎炎綜合征、風(fēng)濕、肝硬化、惡性腫瘤和白血病則會(huì)導(dǎo)致這種蛋白濃度水平的下降。因此，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白的水平對(duì)于以上疾病的診

2、斷和研究具有重要的意義。
　　電化學(xué)發(fā)光(ECL)是利用電解技術(shù)在電極的表面產(chǎn)生某些氧化還原物質(zhì)導(dǎo)致的化學(xué)發(fā)光，ECL不僅保留了化學(xué)發(fā)光分析的諸多優(yōu)勢(shì)，還具有可控性強(qiáng)、重現(xiàn)性佳、選擇性好和可進(jìn)行原位檢測(cè)等特點(diǎn)。近年來，電化學(xué)發(fā)光分析在其應(yīng)用研究和新型ECL材料的合成方面都取得了較大進(jìn)展，而ECL免疫分析技術(shù)的出現(xiàn)更是使電致化學(xué)發(fā)光在生物分析領(lǐng)域，特別是在生物標(biāo)志物分析領(lǐng)域的應(yīng)用前景得到了極大的擴(kuò)展。現(xiàn)有的ECL免疫分析方法多采用傳

3、統(tǒng)的免疫標(biāo)記技術(shù)，其標(biāo)記過程費(fèi)時(shí)耗力，成本較高，標(biāo)記效率卻往往較低，而且還有可能在標(biāo)記過程中使生物分子的活性喪失。故而，研究出一種摒棄繁瑣傳統(tǒng)標(biāo)記過程的ECL免疫檢測(cè)方法，將在生物標(biāo)志物免疫分析方面具有重大的實(shí)用前景。因此，本文主要圍繞免標(biāo)記電致化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)轉(zhuǎn)鐵蛋白進(jìn)行了如下研究:
　　將基于魯米諾還原納米金修飾一次性使用的絲網(wǎng)印刷電極作為傳感平臺(tái)，建立了一種一次性免標(biāo)記電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器，用于檢測(cè)人轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)

4、。本研究中，借助了魯米諾還原納米金具有強(qiáng)大而穩(wěn)定的ECL這一性質(zhì)，將之用于修飾傳感界面，建立起了免標(biāo)記免疫分析方法，并研制了轉(zhuǎn)鐵蛋白的免疫傳感器。研究中采用了絲網(wǎng)印刷電極，以達(dá)到降低成本和一次性使用的目的。利用免標(biāo)記模式，實(shí)現(xiàn)對(duì)TRF的高靈敏度檢測(cè)，得到線性范圍為0.1-18 ng mL-1，檢測(cè)限為0.033ng mL-1。將本法應(yīng)用于人血清中TRF的檢測(cè)，其檢測(cè)結(jié)果與ELISA方法比較具有很好的一致性，并且本法在穩(wěn)定性和特異性方面的