以CdTe和CdSe量子點(diǎn)為標(biāo)記物的光譜型電化學(xué)發(fā)光免疫分析.pdf

1、電化學(xué)發(fā)光(electrochemiluminescence，ECL)是一種發(fā)生在電極表面的經(jīng)過(guò)電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)而產(chǎn)生的一種光輻射現(xiàn)象。近些年來(lái)，ECL作為一種高選擇性和高靈敏性的診斷和分析方法，已經(jīng)得到廣泛關(guān)注和應(yīng)用。該方法有背景信號(hào)低，檢測(cè)靈敏度高，實(shí)驗(yàn)設(shè)備簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì)。本論文利用ECL光譜的高靈敏性，成功論證了光譜型ECL可作為熒光實(shí)驗(yàn)技術(shù)的替代技術(shù)。同時(shí)提出了使用ECL光譜作為輸出方法檢測(cè)抗原的夾心免疫策略。該策略以前列腺特異抗原(P

2、SA)和癌抗原125(CA125)為分析物，以雙穩(wěn)定劑包被的近紅外(NIR) CdTe和CdSe納米晶體(NCs)為標(biāo)記物;同時(shí)探究了該策略對(duì)不同抗原的特異性和對(duì)實(shí)際樣品的檢測(cè)性能。主要內(nèi)容如下:
　　1.以NIR CdTe NCs為標(biāo)記物的光譜型ECL免疫分析。NIR NCs有很多優(yōu)勢(shì)，例如好的組織穿透能力和低的背景干擾，使得它在生物成像和光譜成像中很有優(yōu)勢(shì)。傳統(tǒng)的ECL分析是檢測(cè)ECL反應(yīng)的過(guò)程中隨時(shí)間或電位變化的ECL強(qiáng)度。

3、本部分以PSA抗原為目標(biāo)物，以雙穩(wěn)定劑包被的NIR CdTe NCs為標(biāo)記物，通過(guò)光學(xué)手段采集在ECL過(guò)程中產(chǎn)生的所有光子，構(gòu)建了一種近紅外區(qū)的光譜型ECL免疫策略。該免疫復(fù)合物中的CdTe NCs在780 nm處呈現(xiàn)有效的ECL輻射，且半峰寬約為70 nm。ECL光譜信號(hào)的最大強(qiáng)度隨濃度的log值呈線性增長(zhǎng)，其中濃度范圍為20.0 fg/mL～100.0 pg/mL。這表明這樣一個(gè)在NIR區(qū)的，靈敏的和顏色選擇性好的ECL免疫實(shí)驗(yàn)策略

4、提高了對(duì)生物自熒光和組織吸收的抗干擾能力。該光譜型ECL免疫實(shí)驗(yàn)為發(fā)展不同波段的顏色選擇的光譜型ECL實(shí)驗(yàn)提供一個(gè)重要的技術(shù)支撐。
　　2.以綠光區(qū)半峰寬窄雙穩(wěn)定劑包被的CdSe NCs為標(biāo)記物的光譜型ECL免疫分析。對(duì)于多個(gè)波段的ECL策略來(lái)說(shuō)，光譜型的和具有波長(zhǎng)選擇性的ECL策略具有重要意義。雙穩(wěn)定劑包被策略可以有效促進(jìn)量子點(diǎn)表面態(tài)完全鈍化，提高ECL效率和單色性。本部分在自制的ECL采集系統(tǒng)上，通過(guò)收集高度鈍化雙穩(wěn)定劑包被的

5、CdSe NCs的ECL輻射信號(hào)，探究了一種具有半峰寬窄的，基于光譜的ECL免疫策略;同時(shí)作為ECL探針的CdSe NCs結(jié)合目標(biāo)分子CA125形成夾心型免疫復(fù)合物。該ECL探針能釋放峰位置在約555 nm處，半峰寬為39 nm的有效ECL信號(hào)?；谏鲜霾呗?，該光譜型的ECL策略能實(shí)現(xiàn)對(duì)CA125的靈敏檢測(cè)，其中，線性范圍是10-4 U/mL～1 U/mL，檢測(cè)限為5×10-5 U/mL。該策略高的信噪比使得基于光譜的ECL免疫策略可能