埃博霉素柱層析純化工藝研究.pdf

1、埃博霉素是一類由纖維堆囊菌代謝產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類次級代謝產(chǎn)物，并展現(xiàn)出了良好的抗腫瘤細胞活性。其作用機理與傳統(tǒng)抗癌藥物紫杉醇相似，因而在抗腫瘤藥物的研發(fā)領(lǐng)域具有廣闊的發(fā)展前景。埃博霉素的純化是制約其走向市場的瓶頸之一。本論文針對高純度埃博霉素的制備，采用3種技術(shù)手段對埃博霉素的分離進行了工藝研究。
　　凝膠柱層析是一種分子篩過濾層析技術(shù)。本實驗以埃博霉素粗提物為原料，研究了交聯(lián)葡聚糖凝膠LH-20分離純化埃博霉素的工藝，考察了多種工

2、藝因素對埃博霉素分離純化效果的影響。通過實驗得到最佳分離條件為：洗脫劑一次洗脫為丙酮，二次洗脫為甲醇，流速為0.2 mL/min，進樣量埃博霉素A為1.0 mg。在此條件下，得到埃博霉素A和B的純度分別為90.27％和77.34%。
　　離子交換層析通過目標(biāo)物和樹脂基團之間電荷的相互作用實現(xiàn)物質(zhì)的分離。本實驗同樣以埃博霉素粗提物為原料，研究了離子交換樹脂分離純化埃博霉素的工藝，考察了多種工藝因素對埃博霉素分離純化效果的影響。確定最

3、佳分離條件為：選用D301弱堿陰離子交換樹脂，樣品溶液pH為5，吸附流速為1.5 mL/min，洗脫劑為80%乙醇，洗脫流速為1.0 mL/min。在此條件下，埃博霉素的純度由不足10%提高至58.7%。埃博霉素的等溫吸附規(guī)律可用Langmiur方程表示，吸附動力學(xué)規(guī)律可用Lagergren準(zhǔn)一級動力學(xué)方程表示，表明D301樹脂對埃博霉素的吸附特點是單分子層表面吸附。
　　分子印跡技術(shù)通過印跡聚合物的選擇性識別實現(xiàn)物質(zhì)的分離。本實

4、驗首先研究了埃博霉素的結(jié)構(gòu)類似物紅霉素的印跡工藝。采用沉淀聚合法，優(yōu)化后的工藝為：以n(紅霉素)：n(MAA)：n(EGDMA)=1:4:15，乙酸乙酯為致孔劑。單位吸附量達到52.6 mg/g。通過掃描電鏡和紅外譜圖對聚合物進行表征。印跡聚合物的等溫吸附規(guī)律可用Freundlich方程表示，吸附動力學(xué)規(guī)律可用Lagergren準(zhǔn)二級動力學(xué)方程表示，表明該印跡聚合物對紅霉素的吸附特點為多層吸附。然后通過CNST固體發(fā)酵，四氯化碳萃取和制