以海藻殘渣為發(fā)酵底物乳桿菌增殖條件的研究.pdf

1、乳制品已成為人們日常飲食中的重要組成部分，為了使乳制品具有不同的生理活性，通常在乳中加入乳酸菌，所以乳酸菌及適合乳酸菌生長的基礎培養(yǎng)基成為研究的熱點，適宜的基礎培養(yǎng)基應該具有能夠提供菌體生長必需的營養(yǎng)成分、來源廣泛、價格低廉、細胞產率高等特點。利用海藻生產生物柴油后的廢棄物中含有大量的碳水化合物和蛋白質，而且產量大，來源廣，價格低，所以選擇這種廉價又營養(yǎng)豐富的物質作為乳酸菌發(fā)酵的底物，通過營養(yǎng)強化，改變發(fā)酵條件，以及酸解、酶解或者酸解酶

2、解共同作用處理海藻殘渣，從而促進植物乳桿菌09004和保加利亞乳桿菌ATCC11842在海藻殘渣中的增殖。
　　對海藻殘渣的營養(yǎng)成分進行分析，凱氏定氮法測得海藻殘渣的蛋白質含量為15.32％±0.22％;索氏抽提法測得粗脂肪的含量為36.6％±0.51％;高效液相色譜法測定糖組成，海藻糖含量為0.27％±0.04％、葡萄糖含量為0.08％±0.01％、半乳糖含量為0.06％±0.007％、阿拉伯糖含量為0.0085％±0.0007

3、％;氨基酸分析儀測定海藻殘渣中總氨基酸含量為12.26％;直接滴定法測得淀粉含量為17.17％±0.05％。
　　保加利亞乳桿菌ATCC11842在37℃發(fā)酵MRS培養(yǎng)基，最大活菌數(shù)可以達到2.86×107CFU/mL，在37℃發(fā)酵2％(w/v)海藻殘渣，最大活菌數(shù)可以達到1.60×107CFU/mL。對海藻殘渣培養(yǎng)基進行營養(yǎng)強化，分別研究在2％(w/v)海藻殘渣中添加5種維生素（泛酸、核黃素、生物素、鹽酸吡哆辛、煙酰胺），添加氨

4、基酸（胱氨酸、谷氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、色氨酸），添加葡萄糖（添加量為1％，2％，5％），添加蛋白胨（添加量為0.25％，0.5％，1％），通過生長曲線、pH變化、乳酸產量的對比，結果表明:添加維生素和氨基酸可以顯著促進保加利亞乳桿菌ATCC11842的增殖(p＜0.05），顯著提高乳酸產量(p＜0.05）;添加1％(w/v)和2％(w/v)葡萄糖活菌數(shù)顯著高于添加4％(w/v)葡萄糖(p＜0.05)，添加2％(w/v)葡萄糖乳酸產量最

5、高，因此選擇2％(w/v)葡萄糖添加量與不同的蛋白胨添加量復配;添加0.5％(w/v)的蛋白胨活菌數(shù)顯著高于添加0.25％(w/v)和1％(w/v)蛋白胨(p＜0.05），添加0.5％(w/v)和1％(w/v)蛋白胨乳酸產量顯著高于添加0.25％(w/v)蛋白胨(p＜0.05）;然后用葡萄糖和蛋白胨復配，結果表明:1％(w/v)蛋白胨和2％(w/v)葡萄糖的復配添加量可以顯著促進保加利亞乳桿菌ATCC11842的增殖(p＜0.05）。研

6、究不同的發(fā)酵溫度、不同的發(fā)酵酸度對保加利亞乳桿菌ATCC11842發(fā)酵海藻殘渣的影響，結果表明，37℃，pH=6.5最有利于保加利亞乳桿菌ATCC11842發(fā)酵海藻殘渣。用85％的偏磷酸水解，α-淀粉酶水解，以及偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用對海藻殘渣進行預處理，發(fā)現(xiàn)偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用最有利于促進保加利亞乳桿菌ATCC11842發(fā)酵海藻殘渣的增殖。
　　植物乳桿菌09004在37℃發(fā)酵MRS培養(yǎng)基，最大活菌數(shù)可以達到2.56×

7、109CFU/mL，在37℃發(fā)酵2％(w/v)海藻殘渣，最大活菌數(shù)是1.08×108CFU/mL。對海藻殘渣培養(yǎng)基進行營養(yǎng)強化，分別研究在2％(w/v)海藻殘渣中添加5種維生素（泛酸、核黃素、生物素、鹽酸吡哆辛、煙酰胺），添加氨基酸（胱氨酸、谷氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、色氨酸），添加葡萄糖（添加量為1％，2％，5％），添加蛋白胨（添加量為0.25％，0.5％，1％），通過生長曲線、pH變化、乳酸產量的對比，結果表明:添加維生素和氨基酸可以

8、顯著促進植物乳桿菌09004的增殖(p＜0.05），顯著提高乳酸產量(p＜0.05);添加2％(w/v)葡萄糖活菌數(shù)顯著高于添加1％(w/v)和4％(w/v)葡萄糖(p＜0.05），乳酸產量沒有顯著差異，因此選擇2％(w/v)葡萄糖添加量與不同的蛋白胨添加量復配;添加0.5％(w/v)的蛋白胨活菌數(shù)和乳酸產量都顯著高于添加0.25％(w/v)和1％(w/v)蛋白胨(p＜0.05）;然后用葡萄糖和蛋白胨復配，結果表明:1％(w/v)蛋白胨

9、和2％(w/v)葡萄糖的復配添加量可以顯著促進植物乳桿菌09004的增殖(p＜0.05）。研究不同的發(fā)酵溫度、不同的發(fā)酵酸度對植物乳桿菌09004發(fā)酵海藻殘渣的影響，結果表明:37℃，pH=6.5最有利于植物乳桿菌09004發(fā)酵海藻殘渣。用85％的偏磷酸水解，α-淀粉酶水解，以及偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用對海藻殘渣進行預處理，發(fā)現(xiàn)偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用最有利于促進植物乳桿菌09004發(fā)酵海藻殘渣的增殖。
　　經過以上的研究表明