β-內(nèi)酰胺類殘留的毛細管電泳檢測及分子印跡固相萃取研究.pdf

1、β-內(nèi)酰胺類抗生素是現(xiàn)有的抗生素中使用最廣泛的一類具有β-內(nèi)酰胺環(huán)的抗生素，不當?shù)氖褂梅椒ㄒ约斑^量的使用等原因，都不可避免的造成了它在動物源性食品中的的殘留。因此，動物源性食品中β-內(nèi)酰胺類抗生素的殘留問題已經(jīng)受到廣泛的關注。歐盟、美國、日本等均已規(guī)定了一些β-內(nèi)酰胺類抗生素在動物組織中的最大殘留量，這對抗生素檢測方法的檢出能力提出了具體要求。本論文以對青霉素G、頭孢唑林、頭孢哌酮、苯唑西林、阿莫西林5種β-內(nèi)酰胺類抗生素為檢測目標物，

2、開展了高靈敏檢測以及富集凈化方法的研究。
　　建立了以CdTe量子點作為背景熒光物質(zhì)的毛細管電泳-量子點間接激光誘導熒光檢測食品中5種β-內(nèi)酰胺類抗生素殘留的方法。探討了緩沖液pH、磷酸鹽濃度、緩沖液SDS濃度、分離電壓、CdTe量子點濃度對分析物分離度和峰高的影響。最優(yōu)的電泳條件為:緩沖液的pH為8.5、磷酸鹽、SDS和CdTe量子點的濃度為15、20mmol/L和9mg/L、分離電壓為20kv。在最優(yōu)條件下，青霉素G、頭孢唑林

3、鈉、頭孢哌酮鈉、苯唑西林、阿莫西林5種β-內(nèi)酰胺類抗生素可在10min內(nèi)得到良好分離。在實際樣品中的檢出限均在0.005-0.009mg/kg之間;平均加標回收率86.7％-93.2％。該方法滿足多國最大殘留量(MRL)的規(guī)定，可用于實際樣品中β-內(nèi)酰胺類抗生素殘留的檢測。
　　為獲得實際樣品中β-內(nèi)酰胺類抗生素富集和凈化前處理所需的特異性固相萃取填料，對采取沉淀聚合方法制備苯唑西林和頭孢氨芐雙模板印跡微球的條件進行了研究，并對合

4、成的微球進行了分子識別特性研究。優(yōu)化的合成反應參數(shù)是:模板分了n（苯唑西林）∶n（頭孢氨芐）=1∶1，模板（苯唑西林+頭孢氨芐）、功能單體丙烯酰胺與交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯的用量分別為1mmol、4mmol和20mmol（物質(zhì)的量比為1∶4∶20），溶劑甲醇用量100mL，引發(fā)劑偶氮二異丁腈為5mg。合成出的微球具有兩類性質(zhì)不同的吸附位點，頭孢氨芐的低親和性吸附位點平衡常數(shù)和最大表觀吸附量分別為7.315mmol/L和268.39μm

5、ol/g，高親和性吸附位點平衡常數(shù)和最大表觀吸附量分別為0.967mmol/L和67.688μmol/g。苯唑西林的低親和性吸附位點平衡常數(shù)和最大表觀吸附量分別為5.602mmol/L和238.65μmol/g，高親和性吸附位點
　　平衡常數(shù)和最大表觀吸附量分別為1.311 mmol/L和76.375μmol/g。印跡聚合物重復使用次數(shù)不少于9次，具有直接用作固相萃取柱填料的潛力。
　　以頭孢氨芐和苯唑西林雙模板分子印跡聚合