壇紫菜和龍須菜多糖對(duì)巨噬細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、巨噬細(xì)胞是廣泛分布于機(jī)體的一種重要的免疫細(xì)胞，主要起源于骨髓前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞能被外界刺激激活，被活化的巨噬細(xì)胞其吞噬能力顯著增強(qiáng)，能夠通過直接吞噬或者分泌炎性細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α、IL-1β等）、NO和活性氧等抗病原介質(zhì)間接殺死病原體，有效防御外源病原體對(duì)機(jī)體的侵害，是機(jī)體的第一道防線。巨噬細(xì)胞還能夠通過吞噬病原體并呈遞抗原，從而誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答來抵御外界的侵害。海藻多糖近年來被發(fā)現(xiàn)具有多種生物活性，如抗腫瘤、抗氧化、抗病

2、毒、降血脂、免疫調(diào)節(jié)等。海藻資源豐富，探究其生物活性成分，開發(fā)功能性食品從而達(dá)到高值化利用具有重要意義。
　　本研究通過水煮醇沉、DEAE-cellulose纖維柱層析獲得較高純度的紫菜多糖和龍須菜多糖;紫菜多糖的糖含量為81.20％，糖醛酸含量為7.35％，硫酸根含量為14.67％;龍須菜多糖的糖含量為81.19％，糖醛酸含量為8.20％，硫酸根含量為9.33％。利用巨噬細(xì)胞RAW264.7探究紫菜多糖和龍須菜多糖的生物活性。M

3、TT實(shí)驗(yàn)顯示，兩種多糖都能夠有效促進(jìn)RAW264.7的增殖，增強(qiáng)細(xì)胞活性;在5～100μg/mL濃度范圍內(nèi)，紫菜多糖刺激12h，其促增殖作用隨濃度升高而升高，刺激24h，濃度在40μg/mL時(shí)細(xì)胞活力達(dá)到最高，是對(duì)照組細(xì)胞活力的2.7倍;龍須菜多糖濃度在12.5～200μg/mL范圍內(nèi)能夠顯著增強(qiáng)RAW264.7細(xì)胞活力，但各濃度之間無顯著差異。中性紅攝取實(shí)驗(yàn)顯示，紫菜多糖和龍須菜多糖能夠顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，不同濃度(25、50

4、、100μg/mL)的紫菜多糖處理組RAW264.7吞噬能力分別是對(duì)照組的1.8、2.1、2.5倍，不同濃度（50、100、200μg/mL）的龍須菜多糖處理組RAW264.7吞噬能力分別是對(duì)照組的1.7、2.0、2.4倍。此外，紫菜多糖和龍須菜多糖都能夠有效促進(jìn)RAW264.7釋放NO、TNF-α、IL-6等細(xì)胞因子;RAW264.7經(jīng)不同濃度（25、50、100μg/mL）紫菜多糖刺激后，NO釋放量為34.76、49.20、53.1

5、8μmol/L，與對(duì)照組（1.722μmol/L）相比顯著上升，TNF-α含量為136.76、147.08、141.72ng/L，與對(duì)照組(109.84ng/L)相比顯著上升，IL-6的含量(147.17、160.55、155.13ng/L)與對(duì)照組(133.01ng/L)相比顯著上升;經(jīng)50、100、200μg/mL龍須菜多糖刺激后，NO釋放量由對(duì)照組0.21μmol/L上升到50.31、55.13、69.66μmol/L，TNF-α

6、含量為132.20、141.27、149.93ng/L，與對(duì)照組(107.34ng/L)相比顯著上升，IL-6的含量(142.20、151.27、159.93ng/L)與對(duì)照組(127.34ng/L)相比顯著上升。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，紫菜多糖和龍須菜多糖促進(jìn)RAW264.7釋放NO主要是通過JNK和JAK2兩條信號(hào)通路途徑。
　　綜上所述，從壇紫菜和龍須菜中純化的多糖能夠有效激活RAW264.7，促進(jìn)其細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)其吞噬能力，并調(diào)節(jié)