王漿主蛋白MRJPs對果蠅的抗衰老功能及分子機理研究.pdf

1、蜂王漿(RJ)是由5～15d工蜂頭部營養(yǎng)腺(舌腺和鄂腺)分泌，專供蜂王和3d的幼蟲食用的營養(yǎng)物質(zhì)。蜂王漿的化學成分極為復雜，其中蛋白質(zhì)是主要營養(yǎng)和功能成分，其含量約占王漿干物質(zhì)的50％。王漿蛋白分為水溶性及非水溶性兩大類，其中可溶性蛋白約占王漿總蛋白的82～90%，被稱為王漿主蛋白(MRJPs)。
　　 本實驗首先從液料比、離子強度、pH和抽提時間4個單因素出發(fā)，結(jié)合蛋白穩(wěn)定性、生產(chǎn)成本等因素，進行了L9(34)正交實驗，作MR

2、JPs提取工藝優(yōu)化。正交實驗結(jié)果顯示，對MRJPs提取率影響因素從高到低依次是：離子強度、pH、抽提時間和液料比，但是影響效果均不顯著(p>0.05)。最佳提取條件為：液料比8:1(V/W)，離子強度0.5，抽提pH8.0，抽提時間8h。在最佳提取工藝下，MRJPs提取率為81.14%。對提取MRJPs后的副產(chǎn)物回收凍干，測得10-羥基-2-葵烯酸(10-HDA)和總糖回收利用率分別為2.91%、1.26%。經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS

3、-PAGE)檢測，所提取的MRJPs蛋白分子量與分布與報道相符。
　　 其次，用添加1.25%、2.50%、5.00% MRJPs的飼料為實驗組，以基礎飼料和添加1.25%酪蛋白的飼料為陰性和陽性對照，分別培養(yǎng)Canton-S野生型果蠅。結(jié)果顯示，與陰性和陽性對照相比，5.00% MRJPs干預使雄性果蠅的平均壽命分別延長11.93%和7.78%，2.50% MRJPs干預使雌性果蠅的平均壽命分別延長8.98%和7.40%(p<

4、0.05)，表明MRJPs能顯著延長雌雄果蠅的平均壽命。
　　 進一步作攝食量和繁殖力比較，發(fā)現(xiàn)MRJPs能顯著提高果蠅的攝食量和繁殖力(p<0.05)，顯示這兩種因素變化對果蠅的衰老無負面影響。然后測定了7d和21 d各處理雌雄果蠅的銅鋅超氧化物歧化酶[SOD(Cu，Zn)]活力和丙二醛(MDA)含量變化，結(jié)果顯示MRJPs可提高雌雄果蠅的SOD(Cu，Zn)活力，降低雌雄果蠅體內(nèi)的MDA含量(p<0.05)。