白細(xì)胞介素-27對(duì)哮喘小鼠的預(yù)防與治療效果及機(jī)制.pdf

1、目的:
　　支氣管哮喘是一種反復(fù)發(fā)作的呼吸道慢性炎癥性疾病，其發(fā)病率和死亡率在全球范圍內(nèi)一直呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，本文從動(dòng)物水平探索白細(xì)胞介素27(IL-27)是否能減輕哮喘的過敏性氣道炎癥，并在細(xì)胞水平進(jìn)行相關(guān)機(jī)制研究。
　　方法:
　　將75只雌性C57/6J小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、哮喘組、IL-27滴鼻預(yù)防組和IL-27滴鼻治療組。在卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏與滴鼻激發(fā)誘導(dǎo)的小鼠哮喘模型基礎(chǔ)上，加用IL-27干預(yù)，一種為

2、“IL-27小劑量、多次預(yù)防模型”，另一種為“IL-27大劑量、寡次治療模型”。小鼠末次激發(fā)24小時(shí)后麻醉，行氣道反應(yīng)性檢測(cè);取小鼠肺泡灌洗液分離細(xì)胞和上清，分別進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和IL-5和IL-13濃度的檢測(cè)，取肺組織進(jìn)行HE染色和PAS染色，并進(jìn)行炎癥病理評(píng)分。正常小鼠脾臟純化的CD4+T淋巴細(xì)胞進(jìn)行體外分化實(shí)驗(yàn)，并加用IL-27處理，用ELISA檢測(cè)IL-4的水平。CD4+T淋巴細(xì)胞在不同強(qiáng)度的Th2環(huán)境下誘導(dǎo)分化，用IL-27刺

3、激細(xì)胞，提取總蛋白，進(jìn)行Western blot(WB)檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)和STAT1磷酸化水平。治療組小鼠末次激發(fā)24小時(shí)后處死，取肺組織進(jìn)行勻漿，收集上清WB檢測(cè)肺組織STAT1和STAT1磷酸化水平。三分之一預(yù)防組小鼠，激發(fā)前一天處死，取肺組織進(jìn)行勻漿，收集上清WB檢測(cè)肺組織STAT1和STAT1磷酸化水平。三分之一預(yù)防組小鼠，激發(fā)前一天處死，膠原酶消化肺組織細(xì)胞，流式檢測(cè)記憶性Th1細(xì)胞比例。
　　結(jié)

4、果:
　　IL-27小劑量、多次預(yù)防給藥，可以明顯改善OVA誘導(dǎo)的哮喘小鼠的氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性(P＜0.05)，而治療組則無明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。IL-27能明顯抑制初始CD47淋巴細(xì)胞向Th2方向分化，且這種作用不依賴于γ-干擾素IL-10。隨著CD4+T細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中Th2濃度逐漸增高，細(xì)胞上STAT1的磷酸化逐漸受損，IL-27對(duì)Th2分化的抑制作用逐漸減弱，且IL-27無法抑制已分化的Th2細(xì)胞的再分化。哮

5、喘動(dòng)物體內(nèi)肺組織STAT1磷酸化受損，IL-27治療性給藥無法扭轉(zhuǎn)這種損傷;預(yù)防性IL-27給藥提高了小鼠哮喘激發(fā)前肺組織STAT1磷酸化水平，提高了小鼠哮喘激發(fā)前肺組織中記憶性Th1細(xì)胞的比例。
　　結(jié)論:
　　IL-27對(duì)Th2分化的抑制作用是通過STAT1通路進(jìn)行的，IL-27抑制初始CD4+T淋巴細(xì)胞向Th2分化的作用非常卓越，高濃度Th2環(huán)境下或者已朝Th2分化的CD4+T細(xì)胞，由于其細(xì)胞上STAT1磷酸化的明顯受