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文檔簡介
1、目的:
電化學沉積法中不同的電化學參數(shù)可制備形成不同空間結(jié)構(gòu)的礦化膠原涂層。本實驗嘗試通過觀察MC3T3-e1前成骨細胞的黏附、增殖和分化狀況,分析電化學沉積的礦化膠原涂層對前成骨細胞的影響及其機制,并探討有利于成骨的電化學參數(shù)。
方法:
在電化學沉積法中選用不同參數(shù)制備鈦表面礦化膠原涂層,以掃描電鏡觀測表面形貌。在礦化膠原涂層及HA涂層、純鈦對照組表面培養(yǎng)MC3T3-e1前成骨細胞。在培養(yǎng)24h和72h時
2、行MTS檢測,分析細胞黏附和增殖情況。培養(yǎng)24h時,以掃描電鏡觀察涂層表面細胞的形態(tài)和黏附情況。在培養(yǎng)一周和兩周時,通過Western-Blotting法檢測成骨前體細胞ALP、COL-1的表達水平,分析比較不同涂層對細胞分化能力的促進作用。
結(jié)果:
1、前成骨細胞在各涂層上培養(yǎng)24h、72h時,其MTS值均逐漸增長,說明細胞在涂層表面發(fā)生了增殖反應。礦化膠原涂層的MTS值最高,且與純鈦組存在顯著性差異(p<0.01
3、),表明礦化膠原涂層能顯著促進細胞增殖。
2、掃描電鏡觀察顯示前成骨細胞在培養(yǎng)24h時可在各涂層表面生長。在致密型礦化膠原涂層組,細胞伸展良好并伸出了偽足,固定在材料表面,生長情況較其他組更優(yōu)。
3、Western-Blotting檢測:成骨前體細胞在相應基板表面培養(yǎng)一周時多孔型礦化膠原涂層和致密型礦化膠原涂層ALP、 COL-1表達程度均高于純鈦組,且結(jié)果有顯著性差異;此外,致密型涂層組ALP多于多孔型涂層組,并具
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