茶葉籽油脂肪酸組成分析及其主要不飽和脂肪酸分離及轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、我國茶樹資源豐富，種植面積世界之最，茶葉籽作為茶葉產(chǎn)業(yè)中的副產(chǎn)品，其油脂含有多種生理活性物質(zhì)，已被我國衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新資源食品。但由于對茶葉籽油研究較少，基礎(chǔ)資料及深度開發(fā)極為有限。本研究從茶樹品種和提取工藝入手，探索其對茶葉籽油脂肪酸組成的影響，并根據(jù)其組成特點采用尿素包合法同步分離主要脂肪酸油酸和亞油酸，在此基礎(chǔ)上運(yùn)用植物乳桿菌產(chǎn)生的亞油酸異構(gòu)酶對亞油酸進(jìn)行轉(zhuǎn)化研究，最終將酶轉(zhuǎn)化技術(shù)與水酶法提油工藝相結(jié)合，一步開發(fā)含有共軛亞油酸的茶葉

2、籽油。本論文的主要實驗結(jié)果如下：
　　首先對不同茶樹品種和不同工藝提取的茶葉籽油脂肪酸組成進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示：茶葉籽油飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸比值約為1.0:2.7:1.3，其中棕櫚酸相對含量為14.11-16.99％、油酸為46.33-55.48%、亞油酸為23.17-29.40%，3種脂肪酸相對含量在90%以上，品種和工藝對以上指標(biāo)影響較小；28個品種茶葉籽油中均檢測到17種脂肪酸，主成分分析顯示硬脂酸、異

3、油酸、十七碳酸、棕櫚油酸為特征脂肪酸，其含量可用于品種鑒別；茶葉籽油四種提取工藝對大量脂肪酸無明顯差異，對微量脂肪酸相對含量影響較大。
　　其次采用尿素包合法對茶葉籽油中油酸和亞油酸的同步分離進(jìn)行優(yōu)化，分析了尿素脂肪酸比（w/w）、乙醇尿素比（v/w）、包合溫度和包合時間4個因素對油酸和亞油酸純度以及得率的影響，在單因素實驗基礎(chǔ)上通過中心組合試驗優(yōu)化，最終結(jié)果表明：在尿素脂肪酸比（w/w）為4.1:1，95%乙醇尿素比（v/w）為

4、3.7:1，結(jié)晶溫度為-3℃，結(jié)晶時間為7.7h時，分離獲得的油酸純度為72.5%，得率為84.1%，亞油酸純度達(dá)到91.0%，得率56.4%。
　　以亞油酸為底物，通過對植物乳桿菌進(jìn)行產(chǎn)酶誘導(dǎo)：在發(fā)酵時間為19h，底物亞油酸濃度為3.5mg/mL，初始接種量為3%時可獲得亞油酸異構(gòu)酶活性最高。此酶最適溫度為35℃，最適pH值為6.5，在此最適條件下，當(dāng)亞油酸異構(gòu)酶為2mL，底物茶葉籽油亞油酸濃度為1.5mg/mL時，最終可轉(zhuǎn)化獲

5、得共軛亞油酸積累量為191.2μg/mL。
　　最后以水酶法提取技術(shù)為基礎(chǔ)，采用果膠酶和亞油酸異構(gòu)酶復(fù)合酶制劑，對茶葉籽油提取過程中對亞油酸進(jìn)行改性，制備含共軛亞油酸茶葉籽油。通過單因素實驗及中心組合試驗探索果膠酶用量、亞油酸異構(gòu)酶用量、溫度等條件，開展響應(yīng)面分析對酶解液共軛亞油酸濃度進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明最佳工藝條件為：果膠酶（0.2%）酶量為6.86mL，亞油酸異構(gòu)酶（4.0U/mL）酶量為5.58mL，反應(yīng)溫度為43℃。在此條件