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文檔簡介
1、目的:
制備姜黃素并探討其對小鼠急性酒精肝的影響,和在體外對腫瘤的作用,為開發(fā)姜黃素的藥理作用奠定一定的實驗基礎(chǔ)。
方法:
為研究姜黃素對小鼠急性酒精肝的作用,制備姜黃素,參照文獻利用SCR小鼠制備小鼠急性酒精肝模型,并一高、中、低不同的三個濃度對小鼠進行治療和預(yù)防的研究。實驗分為兩大部分:
1.姜黃素對小鼠急性酒精肝的治療作用:先制備小鼠急性酒精肝模型后隨機分為空白組、對照組以及實驗組三組,空白
2、組灌胃同樣劑量的生理鹽水,對照組灌胃同樣劑量的市售成品藥,實驗組灌胃同樣劑量的高、中、低不同濃度的生姜提取物。
2.姜黃素對小鼠急性酒精肝的預(yù)防作用:先把實驗小鼠3組并標記,空白組、對照組以及實驗組分別灌胃同樣劑量的生理鹽水、市售成品藥以及高、中、低不同濃度的生姜提取物。實驗中發(fā)觀察小鼠各項生理指標;試驗結(jié)束后,取小鼠肝臟,觀察其肝臟的形態(tài)結(jié)構(gòu),并檢測ALT、AST的指標。為研究姜黃素對人結(jié)腸癌LOVO細胞的增殖抑制作用,分別
3、以0.25、0.5、1、2、4、8 ug/ml姜黃素作用腫瘤細胞,并用MTT法分析其增值抑制情況,計算半數(shù)抑制濃度IC50;陽性對照以阿霉素濃度為0.5 ug/ml。繪制5天生長曲線;探討姜黃素對人結(jié)腸癌LOVO細胞的增殖抑制作用。用DNA瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA的斷裂情況,檢測細胞凋亡。
結(jié)果:
中藥生姜中提取得到姜黃素,在小鼠急性酒精肝的實驗中提示,在小鼠急性酒精肝的治療上,劑量為0.005g/kg的姜黃素對小鼠
4、急性酒精性肝損傷有明顯的的治療和預(yù)防作用,但ALT/AST的測定并不能完全說明問題,需近一步證實。在MTT法提示姜黃素的濃度為0.25、0.5、1、2、4、8 ug/ml時,對人結(jié)腸癌LOVO細胞在藥物作用48小時后的抑制率為5%一70.8%,IC50為6.6-32.3。細胞生長抑制曲線結(jié)果證實:作用從第2天開始,顯示出對人結(jié)腸癌LOVO細胞增殖和生長有抑制作用,并隨劑量增加,時間的延長而更加明顯。凝膠電泳圖譜顯示:4ug/ml藥物作用
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