阿托伐他汀和參芍口服液對(duì)DCM的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察2型糖尿病大鼠(Type2 diabetic)心肌組織Toll樣受體4（Toll-like receptor4, TLR4）、核因子-κB（Nuclear factor-κappaBp65, NF-κB p65）、白介素-6（Interleukin-6, IL-6）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(Transforming growth factor-β1, TGF-β1)的變化，探討阿托伐他?。ˋtorvastatin， AT）和參

2、芍口服液（Shenshao oral liquid，SH）對(duì)糖尿病心肌?。―iabetic cardiomyopathy，DCM）大鼠心肌損傷的TLR4-NF-κB炎性信號(hào)通路的影響及對(duì)心肌組織的保護(hù)作用。
　　方法：將購(gòu)入的健康大鼠50只任意分成對(duì)照組（Sham，8只）及實(shí)驗(yàn)組（42只）。對(duì)照組（Sham，8只）全程給予普通飼料，實(shí)驗(yàn)組（42只）全程給予高脂飼料，喂養(yǎng)4周后，實(shí)驗(yàn)組（42只）大鼠采用小劑量鏈脲佐菌素（Strept

3、ozotocin，STZ，25mg/kg）腹腔皮下注射的方法破壞部分胰島β細(xì)胞，制作2型糖尿?。═ype2 diabetes）大鼠模型。分別于STZ注射后3d、7d測(cè)大鼠空腹血糖（Fasting plasma glucose，F(xiàn)BG），兩次均大于16.7mmol/L的實(shí)驗(yàn)組大鼠進(jìn)入藥物干預(yù)階段，成功篩選的糖尿病大鼠任意分組為模型組組（DCM），阿托伐他汀組（DCM+AT），參芍口服液組（DCM+SH）及聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）。

4、阿托伐他汀組（DCM+AT）大鼠按1mg/100g/d灌胃給藥，參芍口服液組（DCM+SH）按照25mg/100g/d灌胃給藥，聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）按1mg/100g/d劑量給予阿托伐他汀(AT)，再按25mg/100g/d劑量給予參芍口服液(SH)，對(duì)照組(Sham)及模型組組(DCM)予以1ml雙蒸水，灌胃給藥8周。實(shí)驗(yàn)全程記錄體重、血糖、精神等一般狀況改變；采用動(dòng)脈壓力導(dǎo)管對(duì)大鼠心功能進(jìn)行評(píng)估；檢測(cè)實(shí)驗(yàn)?zāi)┐笫笱迳?/p>

5、子；HE染色及Masson染色觀察心肌細(xì)胞及間質(zhì)纖維形態(tài)學(xué)改變，電鏡下觀察心肌組織超微結(jié)構(gòu)變化，免疫組化法（Immunohistochemistry）和免疫印跡（Immunoblotting，western）法定量檢驗(yàn)心肌組織TLR4、NF-κBp65、IL-6、TGF-β1因子表達(dá)程度。
　　結(jié)果：1 STZ注射前（0-5W），各組大鼠飲食水、精神狀況、活動(dòng)均正常，對(duì)照組（Sham組）體重逐漸上升，血糖正常；實(shí)驗(yàn)組大鼠喂養(yǎng)高脂飼

6、料，體重較對(duì)照組（Sham組）上升較快，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血糖正?；蚱?，較對(duì)照組（Sham組）無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； STZ注射后（6-16W），對(duì)照組（Sham組）正常生長(zhǎng)，毛色順滑；實(shí)驗(yàn)組大鼠較對(duì)照組（Sham組）出現(xiàn)多飲、多食、多尿現(xiàn)象，并逐漸出現(xiàn)精神萎靡、體重較對(duì)照組（Sham組）下降（12W后P<0.05）、血糖較對(duì)照組（Sham組）升高（6W后P<0.05），經(jīng)阿托伐他汀及參芍口服液干預(yù)后，血糖無(wú)明顯改變，且保持較高水平。2生化指標(biāo)

7、檢測(cè)中，模型組（DCM）較對(duì)照組（Sham）TC、TG、LDL顯著升高（P<0.05），HDL顯著降低（P<0.05），阿托伐他汀組（DCM+AT）及聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）較模型組（DCM）TC、TG、LDL顯著降低（P<0.05）， HDL無(wú)明顯改變，無(wú)統(tǒng)計(jì)意義，參芍口服液組（DCM+SH）較模型組（DCM）TC、TG、LDL、HDL無(wú)明顯改變，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）較對(duì)照組（Sham）CK-MB和C

8、RP明顯升高（P<0.05），阿托伐他汀組（DCM+AT）、參芍口服液組（DCM+SH）及聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）較模型組（DCM）CK-MB和CRP降低（P<0.05），且聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）較前兩者降低更顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。CK于各組間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3模型組（DCM）大鼠心室重量/體重比值（HW/BW）、左心室重量/體重（LVW/BW）明顯高于對(duì)照組（Sham）大鼠(P＜0.05)，阿托伐他汀組

9、（DCM+AT）、參芍口服液組（DCM+SH）及聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）較模型組（DCM）HW/BW、LVW/BW比值均明顯下降(P＜0.05)，且聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）大鼠HW/BW、LVW/BW比值較單藥組（DCM+SH、DCM+AT）下降更顯著(P＜0.05)。4病理觀察中，較對(duì)照組（Sham），模型組（DCM）心肌纖維出現(xiàn)斷裂、扭曲，間質(zhì)增生、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、膠原沉積，心肌細(xì)胞核消失、固染，核染色質(zhì)邊集，線粒體成

10、空泡狀，可見(jiàn)糖原脂類(lèi)顆粒等改變，阿托伐他汀組（DCM+AT）、參芍口服液組（DCM+SH）及聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）較模型組（DCM）上述改變減輕，且聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）改善作用較單藥組更明顯；5心功能檢測(cè)中，與對(duì)照組（Sham）比較，模型組（DCM）心肌左室舒張末期壓力（Left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP）顯著升高(P＜0.05)，阿托伐他汀組（DCM+AT）

11、及聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）LVEDP均降低(P＜0.05)，且聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）降低更明顯(P＜0.05)。參芍口服液組（DCM+SH）LVEDP無(wú)明顯變化，各組左室收縮期壓力（Left ventricular systolic pressure，LVSP）和左室壓力上升或下降最大速度（Left ventricular pressure rise or fall a maximum speed，±dP/dtmax）

12、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；6免疫組化和免疫印跡顯示，與對(duì)照組（Sham）相比，模型組（DCM）心肌組織TLR4、NF-κBp65、IL-6、TGF-β1蛋白表達(dá)量明顯升高(P＜0.05)，與模型組（DCM）比較，阿托伐他汀組（DCM+AT）及聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）TLR4、NF-κBp65、IL-6、TGF-β1蛋白表達(dá)量顯著降低(P＜0.05)，且聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH）較前兩者下降得明顯(P＜0.05)，參芍口服液組（DCM+

13、SH）較模型組（DCM），NF-κBp65、IL-6、TGF-β1蛋白表達(dá)量下降，但仍高于聯(lián)合用藥組（DCM+AT+SH），TLR4無(wú)顯著改變。
　　結(jié)論：
　　1）阿托伐他汀通過(guò)抑制TLR4/NF-κB炎癥通路，而對(duì)糖尿病心肌病大鼠心肌組織起到降脂、抗心肌纖維化、降低左室舒張壓的多效性保護(hù)作用；
　　2）參芍口服液通過(guò)抑制NF-κB炎癥通路而對(duì)糖尿病心肌病大鼠心肌組織起到抗心肌纖維化的保護(hù)作用；
　　3）阿托伐