胸膜肺炎放線桿菌JL03株的全基因組測序與flp操縱子的結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文胸膜肺炎放線桿菌JL03株的全基因組測序與flp操縱子的結(jié)構(gòu)分析ComPleteGenomeSequencingofAc在施obacilusPleuropneumoniaeStrainJL03StructuralAnalysisofthenPOPeron研究生指導(dǎo)教師指導(dǎo)小組李良軍陳煥春陳煥春周銳專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)碩士研究方向:動物細(xì)菌性傳染病獲得學(xué)位時(shí)間:2008年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)

2、院二00八年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文2.2.4主要試劑......................................……342.3實(shí)驗(yàn)方法........................................……352.3.1細(xì)菌的增殖....................................……352.3.2瓊脂糖擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)................................……35

3、2.3.3細(xì)菌基因組提取及測序文庫構(gòu)建..…，............……352.3.4文庫測序.....................................……362.3.5序列初步拼接..................................……362.4結(jié)果與分析..........................................……362.4.1測序用基因組鑒定..……，..........

4、...........……362.4.2文庫構(gòu)建、質(zhì)量評估及大規(guī)模測序................……372.4.3序列初步拼接..................................……382.5討論…，............................................……382.6結(jié)論................................................……39第3章胸

5、膜肺炎放線桿菌f1P操縱子的結(jié)構(gòu)分析.....................……403.1研究目的及意義......................................……403.2實(shí)驗(yàn)材料...................................……403.2.1菌株..........................................……403.2.2寡核一甘酸引物..............

6、....................……413.2.3培養(yǎng)基....................................……413.2.4主要試劑......................................……413.3.實(shí)驗(yàn)方法...................................……423.3.1細(xì)菌的增殖....................................……42

7、3.3.2細(xì)菌PCR模板制備..............................……423.3.3PCR擴(kuò)增......................................……423.3.4flp操縱子結(jié)構(gòu)分析............................……433.3.5細(xì)菌RNA提取..................................……433.3.6反轉(zhuǎn)錄PCR............

8、........................……443.3.7透射電鏡實(shí)驗(yàn)..................................……443.4結(jié)果與分析..........................................……443.4.1flp操縱子結(jié)構(gòu)分析及序列比較..................……443.4.2flp操縱子完整性的驗(yàn)證(DNA和RNA水平).......……473.4.3胸膜肺

9、炎放線桿菌FIP菌毛檢測..................……493.5討論................................................……493.6結(jié)論................................................……50第4章胸膜肺炎放線桿菌血清1型4074株tadA缺失突變體構(gòu)建.......……514.1研究目的及意義....................