糖尿病周圍神經(jīng)病變動(dòng)物小窩蛋白-1，TLR4，miR-107的關(guān)系.pdf

1、目的:1.探討1型糖尿病并發(fā)糖尿病周圍神經(jīng)病變(DPN)大鼠中小窩蛋白-1(Cav-1)，TOLL樣受體4(TLR4)，miR-107的關(guān)系。2.建立中等劑量鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的2型DPN小鼠模型。
　　方法:1.大鼠腹腔單次注射劑量為65 mg/kg的1％ STZ，喂養(yǎng)4周并測(cè)定糖尿病周圍神經(jīng)病變的相應(yīng)生理指標(biāo)。于第4周提取大鼠L4-L6脊髓(SC)，背根神經(jīng)節(jié)(DRG)組織，采用單核細(xì)胞分離液分離大鼠循環(huán)血單核細(xì)胞并提取

2、血漿。SC，DRG，單核細(xì)胞內(nèi)miR-107的表達(dá)采用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)法檢測(cè);TLR4，髓樣分化因子88(MyD88)，核因子κB p65(NF-κBp65)，Cav-1蛋白表達(dá)采用蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測(cè);血漿白介素-1β(IL-1β)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)。2.小鼠腹腔單次注射劑量為120mg/kg的1％STZ，高脂飼料喂養(yǎng)24周并測(cè)定糖尿病周圍神經(jīng)病變的相應(yīng)生理

3、指標(biāo)。于第12周行口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT)，第24周采集足底表皮測(cè)定表皮神經(jīng)纖維密度(IENFD)，ELISA法檢測(cè)血漿胰島素濃度并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。
　　結(jié)果:1.與對(duì)照組相比，1型糖尿病并發(fā)DPN大鼠組第4周血糖明顯升高，體重、機(jī)械、熱痛閾、IENFD明顯降低(P＜0.05);血漿1L-1β表達(dá)明顯上升(P＜0.01)，單核細(xì)胞miR-107表達(dá)，TLR4、MyD88、NF-κB p65、Cav-1蛋

4、白表達(dá)明顯上升(P＜0.05); SC及DRG miR-107，TLR4、Cav-1蛋白表達(dá)與對(duì)照組相比無(wú)明顯差別。2.高脂飼料聯(lián)合STZ喂養(yǎng)組小鼠第12周OGTT，第24周隨機(jī)血糖、HOMA-IR較對(duì)照組明顯升高(P＜0.05），第24周機(jī)械痛閾、IENFD明顯降低（P＜0.05）。
　　結(jié)論:1.1型糖尿病并發(fā)DPN大鼠第4周在炎癥狀態(tài)下外周血單核細(xì)胞水平出現(xiàn)了TLR4-MyD88信號(hào)通路的激活，同時(shí)miR-107以及Cav-