基因VIId亞型新城疫病毒嚴重侵害免疫系統(tǒng)的分子基礎和宿主機制.pdf

1、ThemolecularbasisandthehostmechanismoftheseverepathologyintheimmunesystemcausedbygenotypeVlldNewcastlediseasevirusPhDcandidate：ZengleiHuAdvisor：ProfXiufanLiuADissertationSubmittedtoYangzhouUniversityInPartialFulfillmento

2、ftheRequirementfortheDoctorDegreeinAgricultureCompletedinMay，2013CommencementinJune，2013Il揚州大學博：卜學位論文損傷有關(guān)。2基因VIId亞型NDV在免疫器官中的致病特性本研究用兩株基因VIId亞型NDV(JS3／05和JS5／05)、基因IX型NDVF48E8和基因Iv型NDVHerts／33感染SPF雞，比較了病毒在淋巴組織中的病理變化、病毒復制

3、和細胞因子應答。為了評價宿主應答在NDV的致病性中的作用，我們選擇JS5／05和Herts／33感染雞的脾臟進行差異轉(zhuǎn)錄組學試驗。我們發(fā)現(xiàn)四個毒株對雞都為致死性，但是JS3／05和JS5／05在脾臟和胸腺中造成的病理學損傷更為嚴重，表現(xiàn)為組織的廣泛性壞死、淋巴細胞大量減少和大量巨噬細胞浸潤等；而Herts／33僅引起脾臟萎縮和中度淋巴細胞增生或減少。病毒載量測定顯示，JS3／05和JS5／05在淋巴組織中的復制水平顯著高于F48E8和H

4、efts／33?；蛐酒Y(jié)果顯示，JS5／05和Herts／33誘導的宿主應答在性質(zhì)上是相似的，在量上是不同的，表現(xiàn)在JS5／05可以上調(diào)大量的炎性反應相關(guān)基因的表達，且基因的表達水平顯著高于Herts／33調(diào)控的基因，說明JS5／05誘發(fā)了更為強烈的機體炎癥反應。細胞因子測定結(jié)果顯示，JS3／05和JS5／05誘導的IFNp、IL1B和IL18的表達水平高于F48E8和Hefts／33誘導的水平，說明JS3／05和JS5／05在淋巴組

5、織中可以誘導更強的細胞因子應答。我們的結(jié)果說明，基因VIId亞型NDV的高效復制及其誘導的過激的炎性反應共同造成了免疫器官中嚴重的病理損傷。3基因VIId亞型NDV嚴重損害免疫系統(tǒng)的分子基礎本研究利用反向遺傳學手段，在基因VIld亞型NDVJS5／05和基因IV型NDVHerts／33之間進行基因互換，構(gòu)建了一系列的重組病毒。基因互換方式包括M、F和HN基因的單獨互換、F和HN雙基因互換以及M、F和HN三基因的同時互換。我們評價了重組病

6、毒在淋巴組織中的臨床病理學特性、病毒復制和誘導的細胞因子應答。結(jié)果顯示，單獨互換M、F或HN基因以及互換F和fIN雙基因都不能使JS5／05和Herts／33在脾臟中的病變發(fā)生轉(zhuǎn)換。但是，JS5／05骨架中同時表達Herts／33的M、F和HN基因時，重組病毒造成脾臟壞死的能力消失，病變?yōu)槠⑴K萎縮、無壞死灶，與rHerts／33的病變一致；相應地，Herts／33骨架中同時表達JS5／05的M、F和HN基因時，重組病毒獲得了誘導脾臟嚴重