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文檔簡介
1、目的:
觀察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)對人單核巨噬細胞源泡沫細胞分泌的基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (MMP-9)的表達和活性的影響,以及此過程中,血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)的調(diào)控作用。
方法:
人體外原代培養(yǎng)人單核細胞來源的巨噬細胞,傳至2~6代用于實驗。分組按照:不同濃度ox-LDL(20、40、80mg/ L)與巨噬細胞共同孵育24h,以及40mg/l濃度Ox-LDL作用不
2、同時間(1、12、24h),另設(shè)一組LOX-1受體阻斷劑——多聚肌苷酸(Poly I)干預(yù)組。用RT-PCR 法測定Lox-1和MMP-9mRNA的表達,用酶譜法分析MMP-9蛋白酶的活性。
結(jié)果:
①不同濃度(20、40、80mg/ L)ox-LDL作用24h后,Lox-1和MMP-9mRNA表達升高,各組間數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),并與ox-LDL呈劑量-效應(yīng)關(guān)系,(P<0.05)。40m
3、g/l濃度Ox-LDL作用不同時間(1、12、24h)后,Lox-1和MMP-9mRNA表達升高,各組間數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),并與ox-LDL顯著呈時間-效應(yīng)關(guān)系(P<0.05)。
②不同濃度(20、40、80mg/ L)ox-LDL作用24h后, MMP-9 活性升高,各組間數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),并與ox-LDL顯著呈劑量-效應(yīng)關(guān)系(P<0.05)。40mg/l濃度Ox-LDL作用
4、不同時間(1、12、24h)后, MMP-9 活性表達升高,各組間數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),并與ox-LDL顯著呈時間-效應(yīng)關(guān)系(P<0.05)。
③多聚肌苷酸抑制后,與單純ox-LDL(40mg/ L)干預(yù)組相比,MMP-9mRNA的表達與MMP-9 活性明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
LOX-1、MMP-9的表達及MMP-9蛋白酶的活性與ox-LDL在一
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