白細胞介素-17對人滑膜細胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9基因表達的影響.pdf

1、背景:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是一種慢性自身免疫性疾病,致殘率高,常常影響患者生活質(zhì)量,嚴重者甚至危及患者壽命。其主要特點是滑膜炎反復(fù)發(fā)作,導(dǎo)致軟骨、骨質(zhì)及關(guān)節(jié)周圍結(jié)構(gòu)的侵蝕和破壞,但是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的病因仍不明確。IL-17是CD4+T細胞亞群TH17分泌的細胞因子,能調(diào)節(jié)前炎性因子的產(chǎn)生及分泌,在白細胞的遷移、破骨細胞的活化和骨質(zhì)的吸收等方面發(fā)揮重要作用。
　　 研究目的:探討白細胞介素-17(IL-17)對人滑膜細胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9(

2、MMP-9)基因表達的調(diào)節(jié)作用及意義,更好地理解類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生機制。
　　 研究方法:收集急性外傷性半月板損傷患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織(8例),采用組織塊培養(yǎng)法進行原代滑膜細胞培養(yǎng),取第3至5代細胞用流式細胞儀鑒定細胞,然后用不同劑量重組人IL-17(分別為:0、1、10、20 ng／ml)刺激傳代培養(yǎng)的人滑膜細胞24 h,用RT-PCR檢測各組MMP-9基因的表達；另外用劑量為10 ng／ml重組人IL-17分別作用于傳代培養(yǎng)的

3、人滑膜細胞0,12,24,36h,用RT-PCR檢測在不同作用時間內(nèi)MMP-9基因的表達。
　　 結(jié)果:組織塊培養(yǎng)法獲得的人滑膜細胞符合人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細胞的特點,這些細胞均一的表達CD90、而不表達CD14,并且表達一定量的MMP-9。以1、10、20 ng／ml重組人IL-17作用滑膜細胞24 h,MMP-9mRNA表達均較對照組(0 ng／ml組)高,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),且存在明顯的正相劑量依賴關(guān)系；以1

4、0 ng／ml的重組人IL-17作用滑膜細胞12、24、36 h,與對照組(0 h組)比較,12h、24h及36 h組表達增加差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)；12 h后MMP-9 mRNA表達增加,24 h到達高峰,36 h后明顯下降。
　　 結(jié)論:
　　 1.組織塊培養(yǎng)法可以有效分離人關(guān)節(jié)滑膜細胞,能獲得高純度的人成纖維樣滑膜細胞。
　　 2.IL-17可以按照劑量依賴方式正向調(diào)節(jié)人的滑膜細胞MMP-9基因表