創(chuàng)傷性腦損傷合并四肢骨折后大鼠血清對成骨細胞和破骨細胞的影響.pdf

1、研究目的：通過建立Sprague-Dawley大鼠股骨骨折合并創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)的動物模型，觀察傷后大鼠血清對成骨細胞、成熟破骨細胞及破骨前體細胞Raw264.7的影響，探索四肢骨折合并顱腦損傷后，機體及體液因素成骨細胞和破骨細胞的作用。
　　 研究方法：取250-300g SD大鼠40只，平均分入股骨骨折合并腦損傷組（A組）、單純股骨骨折組（B組）、單純腦損傷組（C組）和完全對照組（D組）。建立股骨骨折及創(chuàng)傷性腦損傷模型，

2、于傷后24小時取每組全部10只大鼠血液并提取血清，混合后按10％加入細胞培養(yǎng)液，觀察其對大鼠的成熟破骨細胞、成骨細胞及其與RAW264.7細胞共培養(yǎng)體系的作用。計數加入血清3天后成熟破骨細胞TRAP染色陽性數目；定量測定7天后成骨細胞堿性磷酸含量。對于共培養(yǎng)體系，將RAW264.7細胞與成骨細胞共培養(yǎng)10天后生成的破骨樣多核巨細胞進行TRAP染色鑒定并計數，采用RT-PCR半定量測定破骨細胞標志酶MMP-9和TRAP的表達。
　　

3、 實驗結果：加入血清后，各組成熟破骨細胞TRAP染色陽性數目無明顯統(tǒng)計學差異。A組和B組成骨細胞增殖速度較C組和D組加快，提前進入對數生長期及平臺期，堿性磷酸酶定量結果較C組和D組升高。同時，經誘導產生的TRAP染色陽性細胞相對C組和D組減少，破骨細胞標志酶基因MMP-9和TRAP表達量減低。
　　 實驗結論：創(chuàng)傷性腦損傷后，體液因素中的血清對已成熟的破骨細胞未表現出顯著作用，但可使破骨前體細胞的分化成熟受到抑制，同時促進成骨