CD4+CD28nullT細(xì)胞鉀通道作為急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者免疫調(diào)節(jié)靶點(diǎn)的研究.pdf

1、目的:調(diào)控 CD4+CD28null T細(xì)胞鉀通道的活性,有可能成為治療急性冠狀動(dòng)脈綜合征(ACS)一個(gè)新的靶點(diǎn)。但是由于 ACS患者CD4+CD28null T淋巴細(xì)胞的特殊性,目前尚不清楚該細(xì)胞的分子表型及鉀通道表達(dá)模式。因此,本實(shí)驗(yàn)主要探討 CD4+CD28null T淋巴細(xì)胞的分子表型及鉀通道表達(dá)模式。方法:磁珠分選 ACS患者和健康對(duì)照組外周血CD4+CD28null T細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表型,并用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄細(xì)

2、胞活化前后離子通道的表達(dá)。運(yùn)用實(shí)時(shí)定量 PCR檢測 Kv1.3和KCa3.1通道阻滯劑對(duì) CD4+CD28null T細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響。結(jié)果:與健康對(duì)照組相比,來源于 ACS患者的CD4+CD28null T淋巴細(xì)胞超過80％為 CD45RA-CD45RO+CCR7-表型。在靜息狀態(tài),ACS患者和健康對(duì)照組的CD4+CD28null T細(xì)胞均表達(dá)少量的電壓依賴性 Kv1.3通道和鈣活化KCa3.1鉀通道。在活化后,ACS患者 CD

3、4+CD28null T細(xì)胞的Kv1.3通道數(shù)量為靜息狀態(tài)的4倍左右,而KCa3.1通道數(shù)量無明顯變化,與效應(yīng)記性 T細(xì)胞 Kv1.3highKCa3.1low通道表達(dá)模式一致。特異性 Kv1.3通道阻滯劑5-(4-phenoxybutoxy)psoralen PAP-1可抑制ACS患者 CD4+CD28null T細(xì)胞干擾素γ和穿孔素的生成。結(jié)論:CD4+CD28null T淋巴細(xì)胞 Kv1.3通道有可能成為 ACS患者免疫調(diào)節(jié)治療的

4、重要靶點(diǎn)。
　　近年來一系列研究表明鈣離子內(nèi)流在激發(fā)淋巴細(xì)胞活化過程中發(fā)揮關(guān)鍵性的作用。通過膜片鉗技術(shù)分析,分子構(gòu)象鑒定以及運(yùn)用特異性離子通道阻滯劑和基因操縱進(jìn)行的功能學(xué)研究等,表明有多種離子通道與淋巴細(xì)胞活化過程中鈣離子信號(hào)的啟動(dòng),強(qiáng)度以及持續(xù)時(shí)間等密切相關(guān)。目前,研究較為清楚的T淋巴細(xì)胞離子通道主要包括以下五種:Kv1.3, KCa3.1,STIM1+Orai1(也稱為鈣釋放活化的鈣通道,CRAC通道),Clswell, TR