圍產(chǎn)斯科爾沁黃牛外周血淋巴細胞HSP70的表達的研究.pdf

1、目的:通過探討圍產(chǎn)期間科爾沁牛外周血淋巴細胞HSP70的動態(tài)表達，揭示圍產(chǎn)期免疫抑制狀態(tài)下HSP70表達變化對免疫細胞功能調(diào)控作用，為科爾沁牛圍產(chǎn)期免疫狀態(tài)評價亦提供理論依據(jù)。
　　方法:選用科爾沁牛(2-3胎)10頭，同期發(fā)情、配種，從中選5頭受孕牛(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)，于分娩前14、7和2天（-14d、-7d、-2d）、分娩當(dāng)天(0d)、分娩后2、7和14天(2d、7d、14d)頸靜脈采血。分離血清，采用放射免疫的方法檢測血

2、清中GC含量;分離外周血內(nèi)淋巴細胞，分別采用流式細胞分析技術(shù)、實時熒光PCR、WesternBlot法檢測淋巴細胞周期分布變化，淋巴細胞內(nèi)HSP70、GRαmRNA與HSP70、GR蛋白表達。
　　結(jié)果:1.淋巴細胞G0/G1期從-14d～0d受抑制比例逐漸降低，分娩后0d～14d逐漸恢復(fù)，0d時比例最低，差異顯著(P＜0.05);S期產(chǎn)前-14d～0d逐漸升高，產(chǎn)后0d～14d緩慢降低，0d時S期比例最高，與-14d、-7d、-

3、2d、2d、7d、14d相比差異極顯著(P＜0.01);G2/M期與G0/G1期變化規(guī)律相同。PI％產(chǎn)前-14d～0d逐漸升高，產(chǎn)后0d～14d緩慢降低，0d時細胞增殖比例最高，差異顯著(P＜0.05)。
　　2.淋巴細胞內(nèi)HSP70mRNA產(chǎn)前-14d～-2d，表達量逐漸減少，差異性顯著(P＜0.05)，分娩后2d～14d，表達量升高，差異性顯著(P＜0.05)，0d時表達量最低，與0d相比，-14d、-2d、2d、14d時表達

4、量差異極顯著(P＜0.01)。淋巴細胞內(nèi)HSP70表達與HSP70mRNA表達變化規(guī)律基本一致。
　　3.血清中GC含量從-14d～0d開始逐漸升高，分娩后0d～14d再逐漸降低，其中-2d～2d血清內(nèi)GC含量變化明顯，差異顯著(P＜0.05)，0d時血清內(nèi)GC含量最高，與0d相比，-14d、-2d、2d、14d時表達量差異極顯著(P＜0.01)，-14d～-2d、2d～14d下降或升高趨勢相對平緩。
　　4.淋巴細胞內(nèi)GR