DJB對非肥胖大鼠T2DM及其主動脈并發(fā)癥的防治及機制研究.pdf

1、背景和目的:2型糖尿病(T2DM)是一種常見的、多發(fā)的內(nèi)分泌代謝失常性疾病。傳統(tǒng)治療方法，包括控制飲食、加強運動、口服降糖藥、注射胰島素，都很難使患者血糖長期保持正常，也不能避免各種并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。上世紀(jì)末，國外在回顧性分析接受減肥手術(shù)患者的臨床資料時發(fā)現(xiàn)，治療肥胖癥的Roux-en-Y胃轉(zhuǎn)流術(shù)(gastric bypass，GBP)對并存的T2DM也能治愈，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)GBP還可以預(yù)防T2DM并發(fā)癥的發(fā)生。但是，對于大量非肥胖

2、的T2DM患者，GBP是否同樣有效則尚未明確。
　　十二指腸空腸轉(zhuǎn)流術(shù)(duodenal-jejunal bypass，DJB)是GBP的改良術(shù)式，它不會影響患者進(jìn)食量，從而避免對非肥胖T2DM患者造成明顯體重下降，但又能達(dá)到食物轉(zhuǎn)流的效果。DJB對非肥胖T2DM患者是否具有治療作用則缺乏更多動物、臨床多中心實驗來進(jìn)一步證實。
　　本研究首先通過觀察DJB前后非肥胖T2DM大鼠的血糖、血脂變化情況來了解其治療效果，其次通過檢

3、測回腸L細(xì)胞胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)的表達(dá)，肝臟、胰腺內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及炎癥信號通路的變化了解其可能的治療機制，最后觀察大鼠主動脈形態(tài)變化及炎癥信號通路的改變，探討DJB對糖尿病大鼠主動脈并發(fā)癥的防治作用及可能機制。
　　方法:(1)利用高脂高糖飲食加腹腔注射小劑量鏈尿佐菌素建立SD大鼠非肥胖T2DM模型，成模大鼠分為DJB手術(shù)組，假手術(shù)組，2型糖尿病對照組，另設(shè)正常SD大鼠對照組，前兩組分別實施DJB手術(shù)及假手術(shù)，術(shù)后觀察12

4、周，測定血糖、血脂、胰島素及TNF-α變化情況，了解DJB手術(shù)降糖降脂效果，并觀察各組大鼠胰腺胰島形態(tài)變化，用免疫組化技術(shù)檢測各組大鼠回腸L細(xì)胞GLP-1蛋白表達(dá)情況。
　　(2)術(shù)后12周取各組大鼠肝臟、胰腺組織分別用qPCR檢測PERK，eIF2α，IRE1，IKKβ，JNK1 mRNA表達(dá)變化，用Western-blot檢測PERK，eIF2α/p-eIF2α，IRE1，IKKβ/p-IKKβ，JNK1/p-JNK1蛋白表達(dá)

5、變化。
　　(3)術(shù)后12周觀察各組大鼠升主動脈形態(tài)變化，用qPCR測主動脈IKKβ，JNK1mRNA表達(dá)變化，用Western-blot檢測主動脈IKKβ/p-IKKβ，JNK1/p-JNK1蛋白表達(dá)變化。
　　結(jié)果:(1)非肥胖大鼠T2DM成模率約66.7％，成功建立T2DM大鼠DJB及假手術(shù)模型。術(shù)后12周，DJB組大鼠血糖、血脂、FINS及TNF-α明顯下降，胰島素抵抗改善，體重增長恢復(fù)正常。T2DM對照組、假手術(shù)組

6、大鼠胰腺胰島形態(tài)不規(guī)則。回腸L細(xì)胞GLP-1蛋白表達(dá)在DJB組大鼠最強，其次是正常SD對照組，T2DM對照組和假手術(shù)組之間則無區(qū)別。
　　(2) DJB組大鼠肝臟、胰腺PERK，eIF2α，IRE1，IKKβ，JNK1 mRNA表達(dá)和PERK，eIF2α/p-eIF2α，IRE1，IKKβ/p-IKKβ，JNK1/p-JNK1蛋白表達(dá)均低于T2DM對照組和假手術(shù)組。而T2DM對照組和假手術(shù)組比較無明顯差別。
　　(3) DJ

7、B組大鼠主動脈僅輕微損傷，假手術(shù)組和T2DM對照組則出現(xiàn)泡沫細(xì)胞或動脈粥樣硬化斑塊。DJB組大鼠主動脈IKKβ，JNK1 mRNA表達(dá)和IKKβ/p-IKKβ，JNK1/p-JNK1蛋白表達(dá)均明顯低于假手術(shù)組和T2DM對照組。
　　結(jié)論:高脂高糖飲食結(jié)合小劑量鏈脲佐菌素腹腔注射誘導(dǎo)的非肥胖T2DM大鼠可作為研究DJB手術(shù)治療糖尿病的動物模型。DJB對人工誘導(dǎo)非肥胖T2DM大鼠有確切的治療作用，它可能通過刺激回腸L細(xì)胞分泌GLP-1