流行性乙型腦炎PCR檢測(cè)病毒和中醫(yī)證候特征研究.pdf

1、目的:對(duì)2011年重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院采集流行性乙型腦炎患者（乙腦）的標(biāo)本進(jìn)行病毒分離與鑒定;2011年和2012年收集的乙腦病例，從證候分型和中醫(yī)證候方面分析流行性乙型腦炎的臨床特點(diǎn)，進(jìn)一步明確流行性乙型腦炎的證侯特點(diǎn)和中醫(yī)命名、病因、病機(jī)、演變規(guī)律及中醫(yī)藥療效優(yōu)勢(shì)，探索解決流行性乙型腦炎中的三大主證問(wèn)題，形成中醫(yī)藥防治乙腦的理論體系，為救治乙腦提供循證醫(yī)學(xué)證據(jù)，促進(jìn)中醫(yī)藥防治乙腦的技術(shù)方法和方案的制定。
　　 方法:

2、r>　　 1.采集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院流行性乙型腦炎患者血液及腦脊液標(biāo)本共145份，通過(guò)巢式PCR，實(shí)時(shí)熒光PCR，BHK-21細(xì)胞培養(yǎng)以及接種2-3日齡乳鼠等方法，檢測(cè)并分離乙腦病毒。
　　 2.研究現(xiàn)場(chǎng):研究現(xiàn)場(chǎng)主要是武漢市醫(yī)療救治中心、重慶科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、杭州市第六人民醫(yī)院、成都市傳染病醫(yī)院、貴陽(yáng)市第五人民醫(yī)院。因?yàn)樯鲜龅膸准裔t(yī)院分別是各省的傳染病醫(yī)院，一旦上述省份有乙腦流行，都會(huì)把患者轉(zhuǎn)入這幾家醫(yī)院治療，所以保

3、證了患者的集中性和全面性。另外這幾家醫(yī)院有一定的研究基礎(chǔ)，在研究周期內(nèi)，具備相對(duì)固定的數(shù)據(jù)管理人員。
　　 3.研究對(duì)象武漢市醫(yī)療救治中心、重慶科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、杭州市第六人民醫(yī)院、成都市傳染病醫(yī)院、貴陽(yáng)市第五人民醫(yī)院在2011年-2012年收治的確診為流行性乙型腦炎患者。
　　 入選標(biāo)準(zhǔn):①符合衛(wèi)生部《流行性乙型腦炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》（2008年版）臨床診斷。②血清或腦脊液檢測(cè)乙腦病毒IgM抗體陽(yáng)性的病例。
　　 排

4、除標(biāo)準(zhǔn):①血清或腦脊液檢測(cè)乙腦病毒IgM抗體陰性的病例。②未進(jìn)行血清或腦脊液檢測(cè)的病例。
　　 4.實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要是血清學(xué)檢測(cè)，血清學(xué)檢測(cè)1個(gè)月內(nèi)未接種過(guò)乙腦疫苗者，用免疫熒光法或E LISA法檢測(cè)患者發(fā)病初期的血液或腦脊液中的病毒抗原，有助于早期診斷。用免疫熒光法或ELISA檢測(cè)患者血清或腦脊液中乙腦特異性抗體，具有早期診斷意義。取患者急性期及恢復(fù)期雙份血清，抗體效價(jià)呈4倍以上升高有診斷意義。
　　 由各醫(yī)院檢驗(yàn)科分別

5、檢測(cè)。
　　 5.研究方法現(xiàn)場(chǎng)考查2011年和2012年武漢市醫(yī)療救治中心、重慶科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、杭州市第六人民醫(yī)院、成都市傳染病醫(yī)院、貴陽(yáng)市第五人民醫(yī)院收治的確診為乙腦患者。根據(jù)患者的病例和CRF表，填寫(xiě)“流行性乙型腦炎病例調(diào)查表”，內(nèi)容有:患者基本情況、診斷、入院和出院時(shí)間、典型癥狀、體征、中醫(yī)辨證、出院時(shí)恢復(fù)情況等。根據(jù)調(diào)查表對(duì)乙腦發(fā)病臨床癥狀和中醫(yī)辨證進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.本實(shí)驗(yàn)僅從兒童乙

6、腦患者腦脊液標(biāo)本中分離到1株乙腦病毒，命名為CQ11-66，該病毒能致2-3日齡乳鼠死亡，也能使BHK-21細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞病變效應(yīng)。
　　 2.2011年和2012年共收集病例472例，發(fā)病大都集中在7、8、9三個(gè)月。其中男性患者271例，女性患者201例，男女之間的比例為1.05∶1。5歲以下的兒童225例，6-10歲的兒童173例，大于10歲的患者74例。有450例患者來(lái)自農(nóng)村，居住環(huán)境簡(jiǎn)陋，附近有養(yǎng)豬場(chǎng)或自家養(yǎng)豬，沒(méi)有防蚊措

7、施。
　　 3.臨床癥候:2011年和2012年乙腦患者主要觀察的癥候分別是發(fā)熱445例(94.30％)、頭痛108例(22.90％)、嘔吐43例(9.10％)、抽搐157例(33.30％)、意識(shí)障礙360例(76.30％)、呼吸異常20例(4.20％)、納差375例(79.40％)、乏力418例(88.60％)。
　　 4.病因證候特點(diǎn):2011年流行性乙型腦炎病因證候特點(diǎn)是:毒邪195例，占100％;暑熱之邪148例

8、，占75.9％，夾濕邪152例，占77.9％;內(nèi)陷者146例，占74.9％;輕型、普通型表示衛(wèi)表輕證，出現(xiàn)發(fā)熱，煩躁不安，意識(shí)障礙較少。重型毒陷心包出現(xiàn)抽搐、嗜睡及煩躁不安等癥狀。2012年流行性乙型腦炎病因證候特點(diǎn)是:毒邪277例，占100％;暑邪256例，占92.4％;熱邪258例，占93.1％;夾濕邪213例，占76.9％;內(nèi)陷者216例，占78.0％;輕型、普通型表示衛(wèi)表輕證，出現(xiàn)發(fā)熱，煩躁不安，意識(shí)障礙較少。重型毒陷心包出現(xiàn)抽

9、搐、嗜睡及煩躁不安等癥狀。亡陰1例，占0.4％;亡陽(yáng)6例，占1.4％，轉(zhuǎn)到危重病房治療。
　　 5.辨證分型:2011年收治流行性乙型腦炎195例，證型分布:毒蘊(yùn)肺胃35例，占17.9％;毒損腦絡(luò)98例，占50.3％;毒陷心包62例，占31.8％，未見(jiàn)陰陽(yáng)衰竭、氣陰兩傷證型。2012年收治流行性乙型腦炎277例，證型分布:毒蘊(yùn)肺胃61例，占22.0％;毒損腦絡(luò)115例，占41.5％;毒陷心包90例，占32.5％，陰陽(yáng)衰竭11例，

10、占4.0％，未見(jiàn)氣陰兩傷證型。
　　 6.臨床療效:2011年隨機(jī)對(duì)照組療效:治療組共54例，其中痊愈51例，好轉(zhuǎn)3例，治愈率，94.40％，好轉(zhuǎn)率5.60％;對(duì)照組共43例，痊愈38例，好轉(zhuǎn)5例，治愈率88.40％，好轉(zhuǎn)率11.60％。隊(duì)列研究組療效:治療組共51例，其中痊愈45例，好轉(zhuǎn)6例，治愈率88.20％，好轉(zhuǎn)率11.80％;對(duì)照組共47例，痊愈35例，好轉(zhuǎn)11例，死亡1例，治愈率74.50％，好轉(zhuǎn)率23.40％，死亡率

11、2.10％。2012年隨機(jī)對(duì)照組療效:治療組共119例，其中痊愈99例，好轉(zhuǎn)20例，治愈率83.20％，好轉(zhuǎn)率16.80％;對(duì)照組共57例，痊愈42例，好轉(zhuǎn)13例，治愈率73.70％，好轉(zhuǎn)率26.30％。隊(duì)列研究組療效:治療組共69例，其中痊愈50例，好轉(zhuǎn)18例，死亡1例，治愈率72.50％，好轉(zhuǎn)率26.10％，死亡率1.40％;對(duì)照組共32例，痊愈22例，好轉(zhuǎn)6例，死亡4例，治愈率68.80％，好轉(zhuǎn)率18.80％，死亡率12.50％。

12、
　　 7.三大主癥:
　　 2011年隨機(jī)對(duì)照組:治療組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(5.12±2.20)天、(3.35±1.42)天、(3.8±2.20)天、(20±2.50)天。對(duì)照組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(8.26±1.56)天、(7.58±1.39)天、(7.4±1.30)天、(26±1.86)天。
　　 2011年隊(duì)

13、列研究組:治療組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(5.50±1.30)天、(5.84±1.03)天、(2.23±1.19)天、(23±2.19)天。對(duì)照組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(8.74±1.42)天、(9.72±1.61)天、(5.47±1.39)天、(29±1.87)天。
　　 2012年隨機(jī)對(duì)照組:治療組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩

14、解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(5.68±1.98)天、(4.76±1.39)天、(4.19±2.18)天、(19±3.10)天。對(duì)照組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(9.26±2.29)天、(8.43±1.26)天、(8.26±1.27)天、(24±1.29)天。
　　 2012年隊(duì)列研究組:治療組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(5.50±1.30)天

15、、(6.72±1.17)天、(2.69±1.23)天、(28±2.76)天。對(duì)照組體溫降至正常時(shí)間、平均意識(shí)清醒、平均緩解抽搐時(shí)間、平均住院時(shí)間分別是(7.98±1.69)天、(10.12±1.79)天、(6.47±1.29)天、(30±1.29)天。
　　 結(jié)論：
　　 1.本研究是重慶市首次從兒童乙腦患者腦脊液標(biāo)本中檢測(cè)并分離到流行性乙型腦炎病毒，命名為CQ11-66。
　　 2.從近3年的臨床觀察，根據(jù)葉天

16、士“夏暑發(fā)自陽(yáng)明”，暑溫病，以暑邪為患，暑性炎熱，暑邪致病，多見(jiàn)火熱之證;暑季潮濕，常有暑中夾濕之候;暑熱耗氣傷陰，故后期又有氣陰兩虧之狀。乙腦病機(jī)是暑熱毒邪侵入人體，迅速里傳，氣營(yíng)兩燔為主，既有溫病傳變的共性，又有自身演變的特殊性。初步提煉出流行性乙型腦炎的核心病機(jī)。
　　 3.流行性乙型腦炎中醫(yī)證候規(guī)律，毒蘊(yùn)肺胃型主要表現(xiàn)為微惡寒，發(fā)熱，頭痛，神志清楚，伴有惡心，口渴，喜飲，少抽搐等證候;毒損腦絡(luò)型主要表現(xiàn)為高熱，頭痛，嗜睡

17、昏蒙，偶有抽搐發(fā)作等證候;毒陷心包型主要表現(xiàn)為發(fā)病急驟，劇烈頭痛，躁動(dòng)或狂躁，昏迷，反復(fù)抽搐等癥狀;陰陽(yáng)衰竭型病勢(shì)險(xiǎn)惡，主要表現(xiàn)高熱，體若燔炭，迅速陷入深昏迷，頑固、持續(xù)的抽搐，呼吸氣粗或急促無(wú)力，呼吸不規(guī)則，出現(xiàn)急性亡陰亡陽(yáng)癥狀，如顏面蒼白晦暗、口唇紫紺，汗多如油，手足厥冷等證候。
　　 4.臨床分型中，根據(jù)2009年中醫(yī)藥行業(yè)專項(xiàng)《中醫(yī)藥防治流行性乙型腦炎臨床規(guī)律與診療方案的研究》課題組制定中醫(yī)預(yù)案，基本確立乙腦的有毒蘊(yùn)肺胃

18、、毒損腦絡(luò)、毒陷心包和陰陽(yáng)衰竭。從近2年臨床觀察和分析，毒陷心包所占比例較大，其次為毒損腦絡(luò)、毒蘊(yùn)肺胃。高熱、抽搐和意識(shí)障礙仍是流行性乙型腦炎的三大主證，以毒損腦絡(luò)、毒陷心包型多見(jiàn);發(fā)熱是流行性乙型腦炎常見(jiàn)癥狀，抽搐在毒蘊(yùn)肺胃和毒損腦絡(luò)發(fā)作較少，在毒陷心包證型中比較常見(jiàn)?；颊唧w溫越高，抽搐發(fā)作次數(shù)就越多，意識(shí)障礙持續(xù)時(shí)間就越長(zhǎng)。
　　 5.流行性乙型腦炎病機(jī)和傳變特點(diǎn)，主要體現(xiàn)在暑熱毒、常夾濕、喜內(nèi)陷、易動(dòng)風(fēng)、傷氣陰、亡陰陽(yáng)。毒

19、邪貫穿整個(gè)流行性乙型腦炎發(fā)病過(guò)程，這為確立流行性乙型腦炎治療原則奠定基礎(chǔ)。進(jìn)一步認(rèn)識(shí)乙腦病的傳變符合衛(wèi)氣營(yíng)血及三焦演變規(guī)律，但不拘泥衛(wèi)氣營(yíng)血和三焦傳變的規(guī)律。
　　 6.在治療上，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，積極加強(qiáng)中醫(yī)辨證治療，輕型（毒壅肺胃）治療“宜清不宜下，重用石膏”，故宜辛寒清氣，應(yīng)用白虎湯和銀翹散加減;普通型（毒損腦絡(luò)）清熱解毒，涼營(yíng)醒腦，應(yīng)用清營(yíng)湯加減。重型（毒陷心包）清熱解毒、涼血熄風(fēng)，應(yīng)用清瘟敗毒飲和止痙散加減。極重型（