紅景天苷和榆黃蘑多糖對(duì)酒精性脂肪肝脂肪蓄積和炎性反應(yīng)的作用及機(jī)制的研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)的目的是研究天然產(chǎn)物紅景天苷和榆黃蘑多糖對(duì)酒精性脂肪肝脂肪蓄積和炎癥的作用及機(jī)制。
　　方法:1.紅景天苷體內(nèi)實(shí)驗(yàn)部分使用C57BL/6小鼠建立酒精狂飲模型。通過(guò)HE染色和油紅O染色觀察小鼠肝臟病理變化;檢測(cè)血清中ALT、AST和IL-1β的含量;通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)觀察小鼠肝臟中NLRP3和P2x7R的表達(dá)情況。體外實(shí)驗(yàn)部分使用LPS刺激Raw264.7細(xì)胞和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，提取細(xì)胞總蛋白和RNA，通過(guò)蛋白印跡實(shí)驗(yàn)和q

2、PCR檢測(cè)IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA的變化。
　　2.榆黃蘑多糖體內(nèi)實(shí)驗(yàn)分別建立急、慢性小鼠酒精性肝損傷模型，檢測(cè)小鼠血清和肝臟中ALT、AST和TG的水平;通過(guò)HE染色、油紅O染色和Masson染色觀察小鼠肝臟病理變化;通過(guò)免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠肝臟內(nèi)SIRT1、AMPKα、SREBP1和P2x7R蛋白的表達(dá)情況。體外實(shí)驗(yàn)部分用酒精刺激HepG2細(xì)胞，利用尼羅紅染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂肪含量的變化，并提取細(xì)胞總蛋白，對(duì)AMPKα

3、和P-AMPKα的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果:1.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，紅景天苷預(yù)處理能減輕酒精狂飲所致小鼠肝臟炎性反應(yīng)相關(guān)蛋白P2x7R和NLRP3的表達(dá)，減少血清中轉(zhuǎn)氨酶和促炎性細(xì)胞因子IL-1β的水平;體外實(shí)驗(yàn)中，紅景天苷能下調(diào)LPS刺激Raw264.7細(xì)胞和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞導(dǎo)致的促炎性細(xì)胞因子IL-1β和TNF-αt的基因和蛋白水平。
　　2.榆黃蘑多糖在體內(nèi)能減輕急、慢性酒精攝入引起的小鼠肝臟的炎癥反應(yīng)和脂肪蓄積，減少血清