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文檔簡介
1、目的:觀察不同濃度乙醇趕黃草提取物對大鼠酒精性脂肪肝的治療作用,檢測其對大鼠血脂、血清轉(zhuǎn)氨酶及血清炎性因子含量的影響,觀察肝組織病理學(xué)改變,獲得最佳濃度乙醇趕黃草提取物,探討趕黃草提取物對大鼠酒精性脂肪肝治療作用的可能機(jī)制,為趕黃草應(yīng)用于治療酒精性脂肪肝提供實驗依據(jù)。
方法:(1)選用35%、55%、75%、95%濃度乙醇提取趕黃草主要成分。(2)100只SD大鼠隨機(jī)分為模型組和對照組,模型組大鼠采用高脂含鐵飼料喂養(yǎng)并用52%
2、白酒灌胃,連續(xù)8周,正常飲水,制備酒精性脂肪肝模型;對照組大鼠用普通飼料喂養(yǎng),自由飲水。(3)模型組大鼠分為趕黃草治療組和硫普羅寧治療組,分別給予不同濃度乙醇趕黃草提取物和硫普羅寧進(jìn)行治療。(4)治療期間,觀察大鼠精神、行為等情況,處死后肉眼觀察肝大體改變并計算肝指數(shù)。(5)采用多聚甲醛行灌注內(nèi)固定,取肝固定、石蠟包埋、切片、HE染色,光鏡觀察肝組織病理學(xué)改變;檢測血清轉(zhuǎn)氨酶及血脂含量;檢測肝組織勻漿丙二醛(MDA)及過氧化物歧化酶(S
3、OD)含量;采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)及煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)含量。(6)采用免疫組化(Envision法)觀察肝組織內(nèi)細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)、TNF-α、IL-1β及IL-6的表達(dá)情況。
結(jié)果:(1)高脂含鐵飼料喂養(yǎng)并52%白酒灌胃8周后,模型組大鼠出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍、動作緩慢、嗜睡、毛發(fā)稀疏且無光澤等
4、表現(xiàn),體重明顯增加,與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(2)肝指數(shù)(肝濕重/大鼠體重):與對照組比較,各藥物濃度治療組之間無顯著性差異(P>0.05)。(3)肝肉眼觀察:模型組肝呈土灰色,邊緣鈍厚,體積增大,彈性差,脆性增加;各治療組肝的色澤、體積、質(zhì)地介于對照組與模型組之間。(4)肝組織病理學(xué)觀察:光鏡下模型組肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂,肝索、肝竇模糊不清,肝細(xì)胞內(nèi)可見大小不等的脂滴空泡、點狀壞死及大量炎性細(xì)胞浸潤。不同濃度乙醇趕黃草提取
5、物治療組肝細(xì)胞脂肪變性減輕,可見少量炎性細(xì)胞浸潤,細(xì)胞排列基本整齊,肝小葉結(jié)構(gòu)基本完整,有少量點狀壞死。(5)趕黃草提取物對大鼠脂質(zhì)代謝的影響:與模型組比較,35%、55%、75%及95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組及硫普羅寧治療組均可降低大鼠血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、總膽固醇(TC)含量(P<0.05),升高高密度脂蛋白(HDL)含量(P<0.05);其中95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組與其它治療組比較其作用顯著增強(qiáng)
6、(P<0.05),但降低血清TG的作用與其它治療組比較無顯著性差異(P>0.05)。(6)趕黃草提取物對大鼠血清轉(zhuǎn)氨酶的影響:與模型組比較,35%、55%、75%及95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組及硫普羅寧治療組均可顯著降低大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量(P<0.05),但95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組與硫普羅寧治療組之間比較無顯著性差異(P>0.05)。(7)趕黃草提取物對大鼠肝勻漿MDA、SOD含量的影響:
7、與模型組比較,35%、55%、75%及95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組及硫普羅寧治療組均可明顯降低肝組織內(nèi)MDA含量、升高SOD含量(P<0.05);95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組與其他治療組比較,其作用有顯著差異(P<0.05)。(8)趕黃草提取物對大鼠血清炎性因子含量的影響:與模型組比較,35%、55%、75%及95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組及硫普羅寧治療組均可顯著降低大鼠血清NADPH、IL-1β、TNF-α和IL-6含量(P
8、<0.05);95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組與其它治療組比較,其作用有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(9)趕黃草提取物對相關(guān)炎性因子在大鼠肝組織內(nèi)表達(dá)的影響:與對照組比較,模型組大鼠肝組織內(nèi)細(xì)胞色素P4502E1、IL-1β、TNF-α和IL-6的表達(dá)明顯增強(qiáng),其灰度值明顯升高(P<0.05);各治療組上述因子的表達(dá)明顯降低,且不同濃度治療組間比較,95%濃度乙醇趕黃草提取物治療組IL-1β、TNF-α表達(dá)低于其它治療組(P<0.05)
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