海藻酸鈉對大鼠非酒精性脂肪肝病的治療作用及其機制研究.pdf

1、非酒精性脂肪肝病(Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是指在無飲酒史的情況下，脂質(zhì)在肝臟中過多的蓄積，肝臟發(fā)生脂肪變性，最終導致肝臟的形態(tài)功能發(fā)生變化。在畜牧生產(chǎn)中，脂肪肝病嚴重危害動物自身的健康，主要表現(xiàn)在降低蛋雞產(chǎn)蛋率，影響奶牛圍產(chǎn)期健康，危害犬貓的生命等。目前NAFLD的發(fā)病機制仍不清楚，臨床上缺乏有效的治療藥物。海藻酸鈉(Sodium alginate，SA)是一種天然的海洋生物多糖，具

2、有減肥降脂的作用，但其治療作用機制尚未明確。為探明SA對NAFLD的治療作用，本研究通過飼喂高脂飼料建立NAFLD大鼠模型，用不同濃度的SA水溶液灌胃治療，觀察大鼠肝臟病理變化及肝細胞的超微結(jié)構(gòu)，檢測血清中血脂與肝酶的水平，測定肝臟中與脂肪代謝相關(guān)的基因的表達量，探討SA對肝臟脂代謝的影響及其作用機制。
　　以高脂飲食誘導的NAFLD大鼠模型為研究對象，將126只SD大鼠隨機分為6組，每組21只，分別為空白對照組(NC)、高脂模型

3、組(HF)、海藻酸鈉Ⅰ組(SA-Ⅰ，33.75mg/kg)、海藻酸鈉Ⅱ組(SA-Ⅱ，67.5mg/kg)、海藻酸鈉Ⅲ組（SA-Ⅲ，135mg/kg）和海藻酸鈉Ⅳ組（SA-Ⅳ，270mg/kg），添加高脂飼料飼喂2W造模后，使用不同濃度的海藻酸鈉治療，在第4W、6W和8W時每組處死7只大鼠。通過HE染色法觀察肝臟病變類型以及病變程度、生化法檢測血清中脂質(zhì)水平和肝酶含量、電鏡觀察肝組織的超微結(jié)構(gòu)，實時熒光定量PCR法測定肝臟中與脂質(zhì)代謝相關(guān)

4、基因的表達量。結(jié)果如下:
　　(1)不同濃度的SA對NAFLD大鼠體重及肝重的影響:在8W時，HF組大鼠體重顯著高于NC組(P＜0.05)，各用藥組均能夠降低由高脂飲食導致的體重增加(P＞0.05);在4W、6W和8W時，HF組肝臟重量極顯著高于NC組(P＜0.01)，SA治療4W和6W后，SA-Ⅳ組顯著低于HF組(P＜0.05)，SA治療8W后，SA-Ⅳ組和SA-Ⅲ組極顯著低于HF組(P＜0.01);SA治療4W、6W和8W后，

5、HF組肝臟指數(shù)極顯著高于NC組(P＜0.01)，各治療組與HF組差異不顯著(P＞0.05)。
　　(2)血脂水平的檢測結(jié)果:SA治療4W后，SA-Ⅰ組血清HDL水平顯著高于HF組(P＜0.05)，NC組極顯著高于HF組(P＜0.01)，SA治療6W后，NC組、SA-Ⅲ和SA-Ⅰ組顯著高于HF組(P＜0.05)，SA-Ⅱ組極顯著高于HF組(P＜0.01)，SA治療8W后，SA-Ⅳ和SA-Ⅲ組顯著高于HF組(P＜0.05);SA治療4

6、W和8W后，NC組和治療組大鼠血清中LDL水平極顯著低于HF組(P＜0.01);SA治療6W后，NC組極顯著低于HF組（P＜0.01），SA-Ⅲ組顯著低于HF組(P＜0.05);SA治療4W和8W后，NC組和治療組大鼠血清中TC水平顯著低于HF組（P＜0.05），SA治療6W后，NC組和SA-Ⅳ和SA-Ⅲ組大鼠血清TC水平顯著低于HF組(P＜0.05);SA治療4W和8W后，NC組大鼠血清TG水平極顯著低于HF組(P＜0.01)，SA治

7、療4W、6W和8W后，治療組大鼠血清TG水平極顯著低于HF組(P＜0.01)。
　　(3)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶檢測結(jié)果:SA治療4W和8W后，NC組和治療組大鼠血清ALT水平顯著低于HF組(P＜0.05)，SA治療6W后，SA-Ⅳ組血清ALT水平顯著低于HF組（P＜0.05），NC組和SA-Ⅲ組極顯著低于HF組(P＜0.01);SA治療4W和8W后，NC組和治療組大鼠血清AST水平顯著低于HF組(P＜0.05)，S

8、A治療6W后，NC組極顯著低于HF組(P＜0.01)。
　　(4)電鏡檢查結(jié)果:NC組大鼠肝臟細胞內(nèi)含有少量甚至沒有脂滴，線粒體數(shù)量較多，線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)清晰，線粒體嵴較多;與NC組相比，HF組肝細胞的細胞質(zhì)含有大量脂滴，且脂滴較大，線粒體大量減少，肝細胞線粒體發(fā)生腫脹，線粒體嵴減少，斷裂，有的甚至消失，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，斷裂;與HF組相比，各用藥組均有明顯的改善，細胞內(nèi)的脂滴變小，線粒體數(shù)量變多，腫脹緩解，線粒體嵴數(shù)量增多，

9、且結(jié)構(gòu)清晰。
　　(5)肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因mRNA表達量:SA治療4W后，NC組、SA-Ⅱ組和SA-Ⅲ組肝臟中ACC、FAS、SCD1和SREBR-1c的表達量顯著低于HF組(P＜0.05)，SA治療4W后，SA-Ⅰ組CPT1的表達量顯著高于HF組(P＜0.05)，NC組、SA-Ⅲ和SA-Ⅱ組極顯著高于HF組(P＜0.01);SA治療6W后，NC組、SA-Ⅱ和SA-Ⅲ組大鼠肝臟內(nèi)ACC、FAS和SCD1的表達量顯著低于HF組（

10、P＜0.05），NC組、SA-Ⅰ組、SA-Ⅱ組、SA-Ⅲ組和SA-Ⅳ組大鼠肝臟中SREBR-1c的表達量極顯著低于HF組(P＜0.01)，SA-Ⅱ和SA-Ⅲ組大鼠肝臟中CPT1的表達量極顯著高于HF組(P＜0.01);SA治療8W后，SA-Ⅲ和SA-Ⅱ組大鼠肝臟中ACC、FAS、SCD1和SEBER-1c的表達量顯著低于HF組(P＜0.05)，NC組FAS和SEBER-1c的表達量顯著低于HF組(P＜0.05)，SA-Ⅲ和SA-Ⅱ組大鼠