紅花黃酮類化合物對酪氨酸酶抑制作用的研究.pdf

1、紅花是一種常見的活血化瘀的中藥，也是一種藥食同源的植物。紅花中含有多種營養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)，其中，黃酮類化合物含量豐富。研究發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物是一類有效的酪氨酸酶抑制劑。本文對紅花黃酮類化合物（Safflower Flavonoids,SF）的制備工藝進行優(yōu)化，研究其對酪氨酸酶的抑制活性和其對蘋果切片的保鮮效果。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴對SF的微波提取工藝進行了探討。實驗采用單因素實驗與正交實驗，分別考察了乙醇濃度、微波時間、

2、微波功率、微波溫度及料液比對 SF提取率的影響。實驗結(jié)果表明最佳的提取條件為：乙醇濃度60％，料液比1:35，微波功率800W，微波時間25min，微波溫度50℃，提取2次,得到紅花黃酮粗提物（Safflower Flavonoid Extracts，SFE）。在此條件下，SF的提取率達到10.231%。⑵比較4種大孔樹脂對SFE的吸附與解吸效果，從中篩選出適合SFE分離純化的樹脂，并通過單因素實驗對其吸附與解吸工藝進行探討。得到結(jié)論為

3、：AB-8是純化紅花總黃酮較好的樹脂。靜態(tài)吸附：最佳樹脂用量是1:10(g/mL)，最佳上樣濃度為3mg/mL，最適pH值為4.7，吸附6h，解吸時間4h；動態(tài)吸附：上樣流速為2BV/h，上樣濃度為3mg/mL，70%乙醇以2BV/h流速進行洗脫。用優(yōu)化出的條件進行SF的純化，得到紅花黃酮純提物（Safflower Flavonoid Purfication，SFP）的黃酮純度63.31%，比純化前的21.85%提高2.89倍。⑶研究了

4、SFP對酪氨酸酶的抑制及其機理。以 L-酪氨酸為底物，對SFP抑制酪氨酸酶活性進行動力學(xué)研究，并研究SFP清除自由基和螯合金屬離子的作用，探討其對酪氨酸酶的抑制機理。結(jié)果表明，在實驗濃度范圍內(nèi)，SFP對酪氨酸酶均具有抑制性，且當(dāng)紅花黃酮提取物濃度為3.0mg/mL時，抑制率達到最大值78.03%；IC50值為0.834mg/mL，抑制常數(shù)KI為0.036mg/mL，KIS為0.0064mg/mL。當(dāng)SFP的濃度為3mg/mL時，SFP對

5、酶的抑制率達63.5%。另外，SFP對DPPH·，羥基自由基和超氧陰離子均具有一定清除力；Cu2+、Fe2+與紅花黃酮形成穩(wěn)定的配合物，導(dǎo)致其紫外吸收曲線發(fā)生較大變化，實驗結(jié)果說明：SFP對酪氨酸酶有顯著的抑制作用，抑制類型為可逆的混合型抑制。同時，SFP通過清除自由基和螯合金屬離子達到抑制酪氨酸酶活性的效果。⑷研究紅花黃酮對鮮切蘋果片的保鮮。以不同濃度的SFE、SFP處理鮮切蘋果片，考察對蘋果片褐變度、TSS含量和VC含量的影響。結(jié)果