廣寧紅花油茶餅黃酮類(lèi)化合物的分離及結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、廣寧紅花油茶是山茶科山茶屬油茶組的一個(gè)重要物種。廣寧紅花油茶及其餅粕尤其富含具有多種生物活性的黃酮類(lèi)和皂苷等化合物。目前，對(duì)油茶餅粕的研究主要集中在以總黃酮或皂苷為指標(biāo)進(jìn)行的各種提取工藝的優(yōu)化，還有一些著重于對(duì)得到的粗提物或初步純化物進(jìn)行抗氧化以及抑菌等活性方面的研究。但是，對(duì)提取物中具體成分的研究很少，而且主要還只是針對(duì)一些常見(jiàn)的化合物進(jìn)行分析?；诖?，本文將主要研究廣寧紅花油茶餅的醇提物的分離純化，并對(duì)得到的單體物質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。具

2、體內(nèi)容及結(jié)論如下:
　　(1)廣寧紅花油茶餅粗提液中的黃酮類(lèi)化合物的抗氧化能力探究
　　本試驗(yàn)以有機(jī)溶劑法（乙醇）對(duì)廣寧紅花油茶餅中的成分進(jìn)行提取，得到粗提液。然后以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品作為對(duì)照，測(cè)定粗提物中的黃酮含量，同時(shí)測(cè)定粗提物對(duì)DPPH自由基、ABTS自由基以及羥自由基的清除能力。結(jié)果表明:廣寧紅花油茶餅的60％乙醇提取液，具有很強(qiáng)的DPPH自由基、ABTS自由基及羥自由基清除活性，其IC50分別為8.64、15.944和20

3、.40μg/mL，在一定的濃度范圍內(nèi)，其各種自由基清除率與其各自的濃度呈正相關(guān)。
　　(2)廣寧紅花油茶餅粗提液中活性成分的分離純化
　　本試驗(yàn)先以等體積乙酸乙酯溶液對(duì)廣寧紅花油茶餅的粗提液進(jìn)行了多次反復(fù)萃取，然后以硅膠柱層析法對(duì)其進(jìn)行分離純化。其中，以不同比例的二氯甲烷-甲醇溶液為洗脫劑，進(jìn)行梯度洗脫，分別收集流出液，以硅膠板薄層色譜法對(duì)接收的流出液進(jìn)行合并。然后對(duì)其中得到的4個(gè)組分進(jìn)行高效液相色譜分析和制備。得到了質(zhì)量較

4、大的5個(gè)化合物單體，且這些化合物的純度均大于95％。具體為:從Fr.36-39組分中分離制備得到化合物1;Fr.66組分中分離制備得到化合物2;Fr.67-69組分中分離制備得到化合物3和4;Fr.90-97組分中分離制備得到化合物5。
　　(3)單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
　　對(duì)得到的5個(gè)單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析。本次試驗(yàn)主要采用LC-QTOF-MS和NMR(1H-NMR、13C-NMR、H-H COSY、HMBC、HSQC、TO

5、CSY)法進(jìn)行解析，并通過(guò)結(jié)合文獻(xiàn)資料最終確定出5個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，分別為:原兒茶酸(1)，芹菜素-6-β-D-吡喃葡萄糖甙(2)，山奈酚3-O-α-L-鼠李糖基(1→3)（4'"-乙?；?α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖甙(3)，山奈酚3-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-2，4-O-乙酰基-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-]-β-D-吡喃葡萄糖苷山奈酚3-O-α-L-鼠李糖基(1→3)（4"'-乙?；?α-L-鼠李糖