亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻化感效應(yīng)及細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、近年來，有害赤潮在我國(guó)沿海和世界各地頻繁發(fā)生，嚴(yán)重的影響了海洋生態(tài)系統(tǒng)、海洋水產(chǎn)系統(tǒng)穩(wěn)定，甚至對(duì)海洋漁業(yè)和人類健康產(chǎn)生了巨大的威脅。有害赤潮已經(jīng)成為海洋環(huán)境污染的問題之一，并引起了全球的關(guān)注。目前，對(duì)于有害赤潮的治理方法有很多種，但是，很多治理方法對(duì)于海洋系統(tǒng)具有一定的破壞性，所以，尋找一種高效、低影響的赤潮治理方法迫在眉睫。我們研究的重點(diǎn)是，依據(jù)前人研究的相生相克原理,利用大型海藻細(xì)胞內(nèi)提取出的不飽和脂肪酸來抑制海洋赤潮微藻的生長(zhǎng)。目

2、前，有關(guān)化感物質(zhì)的抑制機(jī)理研究主要有抗氧化系統(tǒng)、光合系統(tǒng)和胞外酶等。尤其是氧化協(xié)迫系統(tǒng)，因?yàn)檠趸{迫系統(tǒng)多于其他的影響因子關(guān)聯(lián)在一起，但是化感物質(zhì)是否直接作用于某種蛋白質(zhì)或者說是否通過直接影響電子在葉綠體、線粒體中的傳遞而引起氧化脅迫的問題還有待于進(jìn)一步的研究。另外，關(guān)于化感物質(zhì)對(duì)于赤潮微藻的抑制是否是通過細(xì)胞凋亡的途徑引起的研究鮮見報(bào)道。所以說，化感物質(zhì)—不飽和脂肪酸對(duì)于赤潮微藻的氧化脅迫和細(xì)胞凋亡研究對(duì)于化感物質(zhì)抑藻劑的開發(fā)和利用具

3、有重要的意義。
　　化感物質(zhì)亞麻酸是在前期研究中從小珊瑚藻和鼠尾藻組織中分離鑒定出來的，具有很強(qiáng)的殺藻活性，本文進(jìn)一步的探究了亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻的抑制機(jī)理。通過研究亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻氧化脅迫和細(xì)胞凋亡的研究來探討亞麻酸對(duì)赤潮微藻的抑制機(jī)理。
　　亞麻酸作為不飽和脂肪酸的一種，普遍存在在植物體中，是動(dòng)植物生長(zhǎng)發(fā)育必不可少的物質(zhì)之一。我們通過研究亞麻酸對(duì)有害赤潮微藻氧化脅迫及細(xì)胞凋亡機(jī)制的影響來探究亞麻酸

4、對(duì)于有害赤潮微藻的化感效應(yīng)。赤潮異彎藻、米氏凱倫藻這兩種藻是近年來有害赤潮形成的主要藻種，本文主要利用多種實(shí)驗(yàn)方法來探究不飽和脂肪酸—亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻氧化脅迫和細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究，從而取得了以下實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻生長(zhǎng)量的影響
　　亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻生長(zhǎng)量的影響呈現(xiàn)低濃度促進(jìn)，高濃度抑制的趨勢(shì)。
　　2.亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻抗氧化系統(tǒng)的影響
　　亞

5、麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，總的來說，隨著亞麻酸濃度的增加，抗氧化酶（SOD、CAT、POD）的活性和抗氧化物質(zhì)（抗壞血酸、GSH）都出現(xiàn)了先升高后下降的趨勢(shì)。
　　3.亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻活性氧的影響
　　亞麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，隨著亞麻酸濃度的增加，羥基自由基、過氧化氫和ROS的含量逐漸的升高，超氧陰離子自由基含量先是升高，隨后又出現(xiàn)了下降的趨勢(shì)。
　　4.亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻

6、和米氏凱倫藻氧化傷害的影響
　　亞麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，隨著亞麻酸濃度的增加，丙二醛的含量出現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)。通過丙二醛含量的變化來反應(yīng)膜脂過氧化的程度。
　　5.臺(tái)盼藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)
　　臺(tái)盼藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)表明，亞麻酸作用赤潮異彎藻和米氏凱倫藻48h后，隨著亞麻酸濃度的增加，藻細(xì)胞的成活率逐漸下降。
　　6.亞麻酸對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻細(xì)胞凋亡機(jī)制的影響
　　(1)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻的超

7、微結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)表明，亞麻酸處理赤潮異彎藻后，赤潮異彎藻的細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞膜內(nèi)陷，細(xì)胞器排列紊亂，部分質(zhì)體界線不明顯并開始溶解，液泡變大，有脂肪滴出現(xiàn)；亞麻酸處理米氏凱倫藻后，米氏凱倫藻細(xì)胞出現(xiàn)質(zhì)壁分離，細(xì)胞內(nèi)部細(xì)胞器排列紊亂，界線模糊，液泡增多，出現(xiàn)脂肪滴和黑色的蛋白顆粒。
　　(2)線粒體膜電位實(shí)驗(yàn)表明，亞麻酸處理的赤潮異彎藻和米氏凱倫藻與未處理的對(duì)照組相比線粒體膜電位降低。
　　(3) Caspase-3,9酶檢測(cè)實(shí)驗(yàn)表明，亞麻