廣東地區(qū)漢族2型糖尿病合并缺血性心肌病及心力衰竭嚴(yán)重程度與ACE2基因A9570G多態(tài)性的相關(guān)性研究.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，勞動(dòng)方式及飲食結(jié)構(gòu)的改變，平均壽命的延長(zhǎng)，糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）的發(fā)病率逐年增高，嚴(yán)重危害人們的身體健康。然而，DM本身并不可怕，可怕的是它的并發(fā)癥。DM可引起多種慢性并發(fā)癥，其中，DM的血管病變是其最嚴(yán)重的并發(fā)癥，因DM血管病變而導(dǎo)致的心臟缺血性疾病是DM患者死亡的主要原因。心力衰竭（heart failure）作為各種心血管疾病的共同轉(zhuǎn)歸，其發(fā)生率隨著心血管疾病在人群中總體發(fā)生率的

2、升高而升高。近30年來(lái)，引起心力衰竭的疾病譜在我國(guó)已發(fā)生變化，冠心病（coronary heart discasc，CHD）已成為引起心衰的首位原因。缺血性心肌?。╥schemic cardiomyopathy，ICM）是CHD的一種臨床類(lèi)型，以左心擴(kuò)大及心力衰竭為主要表現(xiàn)。DM患者具有顯著的CHD好發(fā)傾向，被認(rèn)為是CHD的等危癥。DM性CHD與非DM性CHD相比，冠脈病變常廣泛且嚴(yán)重，ICM發(fā)生率高，且部分ICM患者心力衰竭嚴(yán)重程度與

3、冠脈病變嚴(yán)重程度不一致，提示部分DM合并ICM患者，其心力衰竭不能用心臟大血管病變完全解釋?zhuān)€有其他因素參與DM合并ICM的發(fā)生與發(fā)展。因此，尋找DM性CHD合并心力衰竭的病因并建立有效的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)和發(fā)病前診斷技術(shù)，在臨床上具有重要實(shí)用價(jià)值。事實(shí)上，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化合并心力衰竭是多種危險(xiǎn)因素相互作用的結(jié)果，DM患者常同時(shí)伴有血糖及脂肪酸代謝異常、高血壓等冠狀動(dòng)脈粥樣硬化及心力衰竭共同危險(xiǎn)因素，然而有研究發(fā)現(xiàn)，即使各種心血管危險(xiǎn)因素相似

4、，DM患者ICM發(fā)病率以及心力衰竭程度也存在差異；此外，不同種族DM人群CHD及ICM的發(fā)生率也不同，可見(jiàn)傳統(tǒng)的心血管危險(xiǎn)因素并不能完全解釋DM并發(fā)ICM的發(fā)生率以及心衰的嚴(yán)重程度，其可能與個(gè)體遺傳背景相關(guān)。 2型糖尿病（Type 2 Diabetes mellitus，T2DM）占所有DM患者的95％左右，是威脅人類(lèi)健康最主要的類(lèi)型。目前認(rèn)為，T2DM是由遺傳、環(huán)境、行為多種危險(xiǎn)因素共同參與或相互作用引起的多因子病。遺傳學(xué)病因

5、研究表明，該病受多基因調(diào)控，其并發(fā)癥也可能受病人遺傳背景的影響。目前已發(fā)現(xiàn)多種基因與T2DM及其血管并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展有關(guān)。近年來(lái)，隨著對(duì)腎素-血管緊張素系統(tǒng)（Renin-angiotensin system，RAS）的深入研究，其在T2DM及其并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展中的作用被大量實(shí)驗(yàn)所證實(shí)，RAS各成員相關(guān)基因多態(tài)性也備受關(guān)注，但研究結(jié)果并不一致，有必要深入研究。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（angiotensin converting enzyme 2，

6、ACE2）是2000年發(fā)現(xiàn)的RAS新成員，發(fā)揮與血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（angiotensin converting enzyme，ACE）相拮抗的作用，在RAS中發(fā)揮重要作用。已有研究表明，該基因某些位點(diǎn)的多態(tài)性與疾病的發(fā)生和或表型相關(guān)。本研究采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段多態(tài)性（polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）分析法，檢測(cè)

7、ACE2基因A9570G多態(tài)性，通過(guò)分析ACE2基因A9570G多態(tài)性在不同人群中的分布情況，初步揭示其與T2DM并發(fā)ICM的關(guān)系，為進(jìn)一步研究T2DM并發(fā)ICM的分子遺傳機(jī)制打下基礎(chǔ)，有助于尋找和建立有效的心血管發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)和發(fā)病前診斷技術(shù)。通過(guò)亞組分析，比較不同基因型間心力衰竭嚴(yán)重程度，尋找可用于判斷病情和評(píng)估預(yù)后的基因型，有助于指導(dǎo)臨床治療。 目的意義: 1.觀(guān)察ACE2基因A9570G多態(tài)性與T2DM并發(fā)ICM的

8、相關(guān)性，初步確定相關(guān)疾病的易感基因。 2.篩選T2DM并發(fā)ICM的敏感基因型，有助于易感人群的早期防治。 3.尋找和確定加重心功能衰竭的基因型，根據(jù)基因型制定治療方案，從而使治療個(gè)體化、有效化。 4.從遺傳學(xué)角度尋找T2DM并發(fā)ICM的危險(xiǎn)因素，有助于揭示其遺傳病因和發(fā)病機(jī)制。 對(duì)象與方法: 1.研究對(duì)象: 對(duì)照組100例，T2DM患者327例，其中單純2型糖尿病組（T2DM組）143例，

9、其中2型糖尿病合并缺血性心肌病病組（T2DM+ICM組）88例，2型糖尿病合并其它類(lèi)型冠心病組（T2DM+CHD組）96例。所有研究對(duì)象均空腹抽取外周靜脈血4ml，立即提取DNA或低溫保存?zhèn)溆谩?2.實(shí)驗(yàn)方法: 2.1 用PCR-RFLP分析法檢測(cè)各組ACE2基因A9570G多態(tài)性分布情況，同時(shí)記錄一般臨床資料及生化指標(biāo)，綜合分析ACE2基因A9570G多態(tài)性與T2DM并發(fā)ICM的相關(guān)性。 2.2 以T2DM患者

10、是否患有ICM為因變量Y，年齡、T2DM病程、體重指數(shù)、收縮壓、舒張壓、糖化血紅蛋白、總膽固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和等位基因?yàn)樽宰兞縓，進(jìn)行二分類(lèi)的Logistic回歸分析，尋找T2DM患者并發(fā)ICM的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 2.3 T2DM+ICM組分性別按基因型進(jìn)行亞組分析，以入院時(shí)彩色多普勒超聲心動(dòng)圖評(píng)價(jià)心臟大小及心功能情況，以Genisini積分評(píng)價(jià)冠脈病變情況，分析不同基因型與心力衰竭嚴(yán)重程度及冠脈病變嚴(yán)重程

11、度的關(guān)系。 結(jié)果: 1.廣東地區(qū)漢族人群中存在A(yíng)CE2基因A9570G多態(tài)性。在健康對(duì)照組，男性A/G等位基因頻率為0.59/0.41；女性A/G等位基因頻率為0.52/0.48，AA/AG/GG基因型分別為0.24/0.56/0.2，經(jīng)X2檢驗(yàn)符合Hardy-Weinberg平衡，提示樣本具有群體代表性。與香港健康人比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與高加索人比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.在女性，四組間等位基因頻率和基因

12、型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=0.319，P=0.956和X2=1.232，P=0.975）；在男性，四組間等位基因頻率/基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=11.866，P=0.008），組間多重比較顯示：T2DM+ICM組與對(duì)照組、T2DM組、T2DM+CHD組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，G等位基因頻率顯著高于其它三組；對(duì)照組、T2DM組、T2DM+CHD組三組間兩兩比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.Logistic回歸分析結(jié)果顯示

13、G等位基因是男性T2DM患者并發(fā)ICM的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（Exp（B）=6.464，95％CI為1.281-6.786），不依賴(lài)于年齡、體重指數(shù)、T2DM病程、糖化血紅蛋白、總膽固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白以及高密度脂蛋白； 4.T2DM+ICM組不同基因型間心力衰竭及冠脈病變程度的比較：不同基因型間心力衰竭嚴(yán)重程度的比較：在男性，不同基因型間LVEF和LVFS差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.227，P=0.031和t=-3.486，P

14、=0.001），G基因型者LVEF和LVFS顯著低于A(yíng)基因型者；在女性，不同基因型間LVEF和LVFS差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.260，P=0.773和F=0.188，P=0.829），G基因型者LVEF和LVFS與A基因型者相同。不同基因型間冠脈病變程度的比較：男性和女性各基因型間冠脈Genisini積分差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（在男性，t=0.315，P=0.547；在女性，F(xiàn)=0.034，P=0.967），G基因型者冠脈Genisini

15、積分與A基因型者相同。 結(jié)論: 1、ACE2基因A9570G多態(tài)性分布具有種族差異。 2、ACE2基因A9570G多態(tài)性與T2DM的發(fā)病不相關(guān)。 3、ACE2基因A9570G多態(tài)性與男性T2DM患者并發(fā)ICM的危險(xiǎn)性增高相關(guān)，G等位基因可能是男性T2DM患者并發(fā)ICM的易感基因及獨(dú)立危險(xiǎn)因素。 4、ACE2基因A9570G多態(tài)性與T2DM合并非ICM型CHD不相關(guān)。 5、G基因型與男性T2