長鏈非編碼RNA MEG3通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導食管癌細胞EC109凋亡.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究目的：
　　探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激在長鏈非編碼RNA MEG3誘導食管癌細胞凋亡的作用及其分子機制。
　　材料和方法：
　　制備表達MEG3的質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)染食管癌EC109細胞，分為對照組（Control，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒pcDNA3.1）及實驗組（轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-MEG3），按以下方法進行試驗：
　　(1) RT-PCR檢測MEG3轉(zhuǎn)染后在細胞中過表達情況；
　　(2)CellCounting Kit8(CC

2、K8)染色法檢測過表達MEG3后細胞生長抑制情況；Annexin V-FITC/Propidium Iodide(Annexin V/PI)雙染色法檢測過表達MEG3后細胞凋亡率變化；
　　(3) Western blot檢測過表達 MEG3后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關(guān)蛋白 GRP78、PERK、ATF6、IRE1-α表達情況； Western blot檢測過表達MEG3后凋亡通路相關(guān)蛋白CHOP表達情況。
　　結(jié)果：
　　1.成

3、功在食管癌EC109細胞中過表達MEG3；
　　2. CCK8染色法結(jié)果表明：過表達MEG3顯著抑制了EC109細胞生長，差異具有統(tǒng)計學意義；Annexin V/PI雙染色法結(jié)果表明：過表達MEG3后EC109細胞凋亡率顯著上升，差異具有統(tǒng)計學意義；
　　3. Western blot結(jié)果表明：外源性MEG3顯著增加了EC109細胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激通路相關(guān)蛋白GRP78、PERK、ATF6、IRE1-α及凋亡通路相關(guān)蛋白CHOP

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