血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑對(duì)尿毒癥心肌血小板源性生長(zhǎng)因子及其受體的影響.pdf

1、尿毒癥心肌病是尿毒癥患者的常見(jiàn)并發(fā)癥。除非進(jìn)行腎臟移植，否則，無(wú)論采用血液透析還是腹膜透析，都無(wú)法得到徹底的改善，威脅患者的生存質(zhì)量。尿毒癥心肌病的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，多種神經(jīng)-體液因素參與其中。其主要分子生物學(xué)機(jī)制包括腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)，內(nèi)皮素系統(tǒng)、血栓素-前列腺素系統(tǒng)等等的過(guò)度興奮，其中RAS的作用十分確切。而尿毒癥心肌病涉及到的炎癥介質(zhì)更是種類(lèi)繁多，其中就包括血小板源性生長(zhǎng)因子(platelet—derived grow

2、th factor，PDGF)。RAS是介導(dǎo)尿毒癥心肌病的重要通路，多項(xiàng)研究表明，腎素-血管緊張素抑制劑(RASI)具有延緩心肌纖維化的作用，可以有效減少包括MHD患者在內(nèi)的死亡率。下調(diào)PDGF的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可以減輕心肌纖維化。近期的研究表明，AT1R激活后可以直接上調(diào)PDGF的信號(hào)轉(zhuǎn)錄水平，發(fā)揮轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β之外的致纖維化作用，由于PDGF的分布及其廣泛，血管緊張素Ⅱ的這一作用會(huì)涉及更多的臟器和組織，并且作用將被進(jìn)一步放大。
　　因

3、此，本研究首先建立尿毒癥心肌病大鼠動(dòng)物模型，檢測(cè)心肌組織PDGF受體的表達(dá)水平，同時(shí)觀察應(yīng)用血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑(ARB)治療能否降低尿毒癥心肌病大鼠PDGF受體的表達(dá)水平，減輕模型大鼠的心肌損害程度。其次，選取規(guī)律血液透析患者，給予血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑(ARB)治療，在血壓沒(méi)有較大波動(dòng)的情況下，觀察患者的心臟功能以及血清PDGF水平的變化，判斷較大劑量的ARB是否能改善這部分血液透析患者的心臟功能;血清PDGF水平是否也隨

4、之波動(dòng)。
　　本文主要從以下幾方面進(jìn)行論述：
　　第一部分 血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑對(duì)尿毒癥心肌病大鼠血小板源性生長(zhǎng)因子的影響
　　目的:本研究通過(guò)建立尿毒癥心肌病大鼠動(dòng)物模型，檢測(cè)心肌組織PDGF的表達(dá)水平，同時(shí)觀察應(yīng)用血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑（ARB）治療能否降低尿毒癥心肌病大鼠PDGFα受體(PDGFRα)的表達(dá)水平，減輕模型大鼠的心肌損害程度。
　　方法:首先采用腎動(dòng)脈分支結(jié)扎法建立5/6腎大部切除大

5、鼠模型，然后給予異丙腎上腺素連續(xù)腹腔注射，以完成尿毒癥大鼠心衰模型。大鼠分為三組:纈沙坦組（ARB組）:纈沙坦灌胃n=32;單純腎大切非干預(yù)組(NX組):等體積注射用水灌胃，n=32;假手術(shù)組（sham）:等體積注射用水灌胃，n=20。所有大鼠定期檢測(cè)尾動(dòng)脈血壓、尿白蛋白/尿肌酐比值。5/6腎大部切除的大鼠于二期手術(shù)后7天開(kāi)始進(jìn)入正式試驗(yàn)。在0周和開(kāi)始后滿6周、滿10周和滿11周各時(shí)間點(diǎn)，每組處死分別8只大鼠。分別留取血液和心肌、腎臟組

6、織，進(jìn)行生化檢測(cè)和組織病理檢測(cè)。光學(xué)顯微鏡下，觀察心肌纖維化程度，進(jìn)行Rona標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，同時(shí)應(yīng)用ImagePro Plus software6.0圖像分析系統(tǒng)，計(jì)算心肌組織中膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF);免疫組化觀察心肌組織PDGF受體(PDGFR)的表達(dá)水平;蛋白免疫印記(Western Blot)法檢測(cè)心肌組織PDGFR的含量。
　　結(jié)果:全部5/6腎大部切除大鼠尾動(dòng)脈收縮壓第7周始同sham組比較有顯著升高。ARB組微動(dòng)脈血壓升高

7、幅度明顯低于NX組;ARB組大鼠SCr、BUN水平升高幅度明顯低于NX組;纈沙坦組和NX組的心肌病理檢測(cè)顯示，兩組大鼠的心肌細(xì)胞均表現(xiàn)為肥大，排列紊亂，細(xì)胞間質(zhì)明顯增多。但是纈沙坦組病變程度較NX組輕，治療組的Rona評(píng)分也低于對(duì)照組，差異有顯著性，P＜0.05。免疫組化指數(shù)評(píng)分結(jié)果表明，ARB組和NX組的PDGFR表達(dá)水平均顯著高于sham組，ARB組的PDGFR表達(dá)水平均明顯低于NX組，差異有顯著性，P＜0.05;Western B

8、lot結(jié)果表明，ARB組和NX組的PDGFR表達(dá)水平均顯著高于sham組，差異有顯著性，P＜0.05。ARB組的PDGFR表達(dá)水平均明顯低于NX組，差異有顯著性，P＜0.05。
　　結(jié)論:尿毒癥心肌病模型大鼠的心肌存在明顯的組織學(xué)損害;心肌局部炎癥介質(zhì)PDGFR的表達(dá)水平明顯升高，提示PDGF及其受體參與尿毒癥心肌病大鼠的心肌損害;應(yīng)用ARB纈沙坦治療的大鼠心肌損害明顯輕于未用藥的對(duì)照組，纈沙坦治療的大鼠心肌PDGFR的表達(dá)水平也

9、明顯低于對(duì)照組，提示PDGF及其受體介導(dǎo)的尿毒癥心肌損害，部分是通過(guò)AngⅡ及其1型受體途徑實(shí)現(xiàn)的。
　　第二部分 血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑對(duì)維持性血液透析患者血漿血小板源性生長(zhǎng)因的水平的影響
　　目的:選取原發(fā)病為單純腎臟疾病的血液透析患者，給予患者血管緊張素Ⅱ1型受體拮抗劑(ARB)治療，在血壓沒(méi)有較大波動(dòng)的情況下，觀察患者的心臟功能以及血清PDGF水平的變化，判斷較大劑量的ARB是否能改善這部分血液透析患者的心臟功能

10、;炎癥介質(zhì)PDGF是否也隨之波動(dòng)。
　　方法:41例原發(fā)腎臟病且規(guī)律血液透析的患者，隨機(jī)分為兩組:纈沙坦治療組（治療組），n=22;對(duì)照組，n=19;治療組患者在降壓藥種類(lèi)里均包括纈沙坦（無(wú)其它種類(lèi)RASI）;對(duì)照組降壓藥內(nèi)不含RASI中的任何一種，其余種類(lèi)降壓藥以及用量適當(dāng)增減，以達(dá)到對(duì)照組和治療組相匹配的血壓，觀察時(shí)間為3個(gè)月。采用ELISA方法，檢測(cè)治療組和對(duì)照組在實(shí)驗(yàn)前后血清PDGF水平。
　　結(jié)果:經(jīng)過(guò)3個(gè)月較大劑

11、量的纈沙坦口服，治療組的LVEDD、EF以及A/E等指標(biāo)相比較于對(duì)照組，均有不同程度改善，其中治療組的EF值明顯高于對(duì)照組，P＜0.05。纈沙坦治療組治療后血清PDGF水平明顯下降，同治療前比較差異有顯著性，P＜0.05。對(duì)照組3個(gè)月觀察期前后，血清PDGF水平?jīng)]有明顯變化，差異沒(méi)有顯著性，P＞0.05。
　　結(jié)論:尿毒癥心肌病的患者血清PDGF水平明顯升高，應(yīng)用纈沙坦治療后，血清PDGF水平同心臟EF值的改善同步下降，提示血清P