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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
驗(yàn)證復(fù)方皂礬洗劑對(duì)雄激素性脫發(fā)大鼠的療效,并對(duì)其作用機(jī)制做初步探討。
方法:
建立空白組、模型組、米諾地爾酊0.05g/ml組,復(fù)方皂礬洗劑2g/ml組,復(fù)方皂礬洗劑0.5g/ml組,復(fù)方皂礬洗劑0.25g/ml組劑量組6個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)組,選取60只健康雄性成年SD大鼠,將其隨機(jī)均分到各組中,且在造模的同時(shí)予以外用藥物干預(yù)。各組大鼠均以1ml/(Kg.d)的溶液行頸部皮下注射,空白組注射0.9%的氯化鈉
2、溶液,其余各組注射5mg/ml的丙酸睪酮注射液??瞻捉M及模型組均背部外用蒸餾水,米諾地爾酊組背部外用0.05g/ml的米諾地爾酊,復(fù)方皂礬洗劑2g/ml、0.5g/ml、0.25g/ml組分別背部外用2g/ml,0.5g/ml,0.25g/ml的復(fù)方皂礬洗劑。實(shí)驗(yàn)56天后,處死大鼠,對(duì)大鼠背部皮膚真皮下部橫切面做HE染色,計(jì)數(shù)總毛囊數(shù)量、終毛毛囊數(shù)量、毳毛毛囊數(shù)量,采用比色法對(duì)皮膚組織中的游離脂肪酸(FFA)的含量進(jìn)行測(cè)定,采用單試劑甘
3、油磷酸氧化酶-過氧化物酶法(即GPO-PAP法)對(duì)皮膚組織中的甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)的含量進(jìn)行測(cè)定,以此評(píng)價(jià)模型的建立成功與否及復(fù)方皂礬洗劑對(duì)AGA大鼠的治療效果。選出復(fù)方皂礬洗劑最佳濃度組以進(jìn)行機(jī)制探討,采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(即ELISA法)來測(cè)定血液中的睪酮(T)、雙氫睪酮(DHT)以及皮膚中DHT的含量;以蛋白質(zhì)免疫印跡法(即western blot法)測(cè)定皮膚組織中的固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1(SREBP-1),固醇
4、調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-2(SREBP-2)及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-12(caspase-12)的表達(dá),初步探討復(fù)方皂礬洗劑對(duì)AGA大鼠的作用機(jī)制。
結(jié)果:
模型組中總毛囊和終毛毛囊數(shù)量均較空白組少(P<0.01)。米諾地爾酊0.05g/ml組、復(fù)方皂礬洗劑2g/ml,0.5g/ml,0.25g/ml組總毛囊和終毛毛囊數(shù)量均較模型組多(P<0.01),但隨著劑量的降低總毛囊和終毛毛囊數(shù)量依次遞減(P<0.01)。
5、模型組中TG、TC、FFA的含量均較空白組升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。復(fù)方皂礬洗劑2g/ml組中 TG、TC、FFA的含量均較模型組降低(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。復(fù)方皂礬洗劑0.5g/ml,0.25g/ml組對(duì)油脂的抑制效果減弱。復(fù)方皂礬洗劑2g/ml組大鼠背部皮膚組織中的 DHT含量較模型組降低(P<0.05)。模型組皮膚組織中的SREBP-1、SREBP-2及caspase-12的表達(dá)均較空
6、白組高(P<0.01)。復(fù)方皂礬洗劑高劑量組皮膚組織中SREBP-1、SREBP-2及caspase-12的表達(dá)較模型組表達(dá)均降低(P<0.01)。
結(jié)論:
本實(shí)驗(yàn)中AGA大鼠模型建立成功。0.05g/ml米諾地爾酊與2g/ml,0.5g/ml,0.25g/ml的復(fù)方皂礬洗劑均能改善AGA大鼠脫發(fā)。2g/ml,0.5g/ml,0.25g/ml復(fù)方皂礬洗劑均可降低皮膚中主要油脂的分泌,米諾地爾酊尚不能降低皮膚中油脂分泌
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