梔子豉湯神經(jīng)保護(hù)作用及其化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、梔子豉湯為張仲景《傷寒論》中的經(jīng)典復(fù)方方劑，由中藥材梔子和淡豆豉組成，其臨床上可用于治療失眠、抑郁癥、神經(jīng)性衰弱等心理性亞健康疾病。復(fù)方中的梔子為茜草科植物山梔Gardenia jasminoides Ellis.的干燥果實(shí)，淡豆豉為豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的成熟種子經(jīng)青蒿、桑葉等中藥悶至發(fā)酵而成的加工制品，作為常用性中藥材，在歷版中國藥典中均有詳細(xì)記載。目前國內(nèi)外多以梔子或淡豆豉單味藥材的化學(xué)成分以及藥理藥

2、效為基礎(chǔ)展開研究，關(guān)于梔子豉湯復(fù)方藥材的化學(xué)成分、藥效物質(zhì)以及配伍意義的研究報(bào)道甚少。
　　首先本課題在細(xì)胞層面上對(duì)梔子豉湯復(fù)方的藥理作用進(jìn)行了研究，考察了不同濃度谷氨酸對(duì)于PC12細(xì)胞損傷模型存活率的影響，采用MTT法測定細(xì)胞存活率，確定了當(dāng)谷氨酸濃度為3mmol/L時(shí)，細(xì)胞損傷率達(dá)52％，為PC12細(xì)胞損傷模型的造模條件。隨后考察了系列不同濃度的梔子豉湯對(duì)于模型組細(xì)胞的保護(hù)作用，確定了0.25、0.5和1mg/mL濃度的梔子豉

3、湯對(duì)于PC12細(xì)胞損傷模型具有明顯的保護(hù)作用。根據(jù)對(duì)正常組細(xì)胞、谷氨酸模型組細(xì)胞以及梔子豉湯給藥組細(xì)胞分別進(jìn)行乳酸脫氫酶釋放、谷胱甘肽還原酶水平、總超氧化物歧化酶活性、以及活性氧的檢測，說明谷氨酸模型組可以增加乳酸脫氫酶的釋放量、顯著性降低谷胱甘肽還原酶和總超氧化物歧化酶的活力，并增強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。而系列濃度梔子豉湯給藥組則可以顯著性降低乳酸脫氫酶釋放量、增加細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽含量、增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)總超氧化物歧化酶活力并明顯降低活性氧水平

4、，從而抑制細(xì)胞損傷。由此說明梔子豉湯復(fù)方對(duì)于谷氨酸致PC12細(xì)胞的損傷模型具有明顯的保護(hù)作用，為后續(xù)深入的研究梔子豉湯復(fù)方的化學(xué)成分分析及闡明配伍意義提供有力的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　為充分研究梔子豉湯復(fù)方中的指標(biāo)性成分，基于前期工作對(duì)梔子的活性成分進(jìn)行了充分的探討，因此本課題采用指紋圖譜結(jié)合化學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法建立一種淡豆豉藥材質(zhì)量控制的方法，并對(duì)淡豆豉中特征性成分進(jìn)行定性和定量分析。根據(jù)淡豆豉藥材指紋圖譜中相似度評(píng)價(jià)結(jié)果并結(jié)合聚類分析確定

5、指紋圖譜的色譜峰中對(duì)于淡豆豉質(zhì)量具有明顯干預(yù)作用的成分，采用離子阱-飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)21種化學(xué)成分進(jìn)行定性分析。通過主成分分析和正交校正的偏最小二乘分析的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法甄別出定性的色譜峰中對(duì)淡豆豉質(zhì)量具有統(tǒng)計(jì)學(xué)影響意義的化學(xué)成分進(jìn)行定量分析，共定量11種化合物，分別為黃豆苷，黃豆黃苷，染料木苷，大豆苷元，丙二酰黃豆黃苷，乙酰化黃豆苷，乙?；S豆黃苷，丙二酰染料木苷，乙?；玖夏拒眨玖夏舅睾忘S豆黃素。
　　為進(jìn)一步探討梔子豉湯化學(xué)物質(zhì)基

6、礎(chǔ)研究，本課題又比較了梔子豉湯配伍前后化學(xué)成分的變化，采用離子阱-飛行時(shí)間質(zhì)譜法分別對(duì)梔子豉湯復(fù)方以及梔子、淡豆豉兩種單味藥材進(jìn)行定性鑒別分析和比較，發(fā)現(xiàn)梔子豉湯中缺少西紅花苷Ⅲ、京尼平、3，5-二-O-咖啡?；?4-O-（3-羥基-3甲基）戊二?；鼘幩峄瘜W(xué)成分，同時(shí)淡豆豉中含量較少的化學(xué)成分包括香豆酸、丙二酰黃豆苷、丙二酰黃豆黃素、丙二酰染料木苷、乙?；玖夏拒找参丛跅d子豉湯中檢測出來，但是復(fù)方中定性出Jasminoside A和J