脂肪乳劑對大鼠布比卡因中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性的影響及機(jī)制.pdf

1、動物研究表明脂肪乳劑可以減輕并逆轉(zhuǎn)局麻藥的心臟毒性,并在臨床應(yīng)用中得到證明。早期使用脂肪乳劑不僅可防止心血管毒性的發(fā)生,對神經(jīng)系統(tǒng)毒性也有緩解效果。然而,脂肪乳劑救治局麻藥全身毒性機(jī)制仍未完全闡明,所知可能機(jī)制為:“脂肪池機(jī)制”、“代謝機(jī)制”、加速局麻藥的代謝、擴(kuò)散及對心肌的直接的正性肌力作用等。本研究擬通過動物實驗觀察脂肪乳劑對布比卡因所致局麻藥全身毒性反應(yīng)(Local Anesthetic Systemic Toxicity,LAS

2、T)中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性的影響,并探討其主要作用機(jī)制。
　　 第一部分、脂肪乳劑預(yù)處理對大鼠布比卡因中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性的影響和機(jī)制
　　 目的：研究脂肪乳劑預(yù)處理對布比卡因致SD大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性的影響和主要機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.12只健康SD大鼠隨機(jī)分為兩組:A組為生理鹽水預(yù)處理組(n=6);B組為脂肪乳劑預(yù)處理組(n=6)。
　　 2.大鼠七氟醚吸入麻醉下行氣管切開、氣管插管、機(jī)械通氣、

3、頸動脈、股靜脈穿刺等。實驗過程記錄ECG、BP、MAP、EEG、HR。
　　 3.麻醉后15min,給予生理鹽水預(yù)處理(A組)或20％脂肪乳劑預(yù)處理(B組),兩組經(jīng)左股靜脈微量泵輸注,輸注速率均為3ml/kg/min,輸注時間為5min。
　　 4.輸注完畢后,兩組均經(jīng)右股靜脈微量泵輸注0.5%布比卡因2mg/kg/min,腦電圖第一次出現(xiàn)腦痙攣波(SZ),重疊高尖波＞100μV時,停止布比卡因輸注,立即斷頭處死大鼠,取

4、大鼠腦組織標(biāo)本。記錄布比卡因使用劑量、出現(xiàn)腦痙攣波(SZ)的時間等。
　　 5.高效液相色譜法檢測腦組織布比卡因濃度,采用液—液萃取法。
　　 結(jié)果：
　　 1.兩組的基礎(chǔ)MAP分別為:A組104.8±6.8mmHg和B組104.5±7.7mmHg,兩組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.939);HR分別為:A組296.5±8.2次/min和B組297±8.0次/main,兩組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.917

5、)。
　　 2.出現(xiàn)腦痙攣波時間:脂肪乳劑預(yù)處理組(B組,311.8±30.3s)顯著延后于生理鹽水預(yù)處理組(A組,158.2±7.9s),兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。B組布比卡因總用量(10.4±1.0mg/kg)高于A組(5.3±0.3mg/kg),兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3.兩組腦組織布比卡因濃度分別為:A組6.1±1.4mg/kg和B組6.6±0.3mg/kg,兩組間比

6、較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.427)。
　　 結(jié)論：脂肪乳劑預(yù)處理能降低大鼠布比卡因的中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性,推測脂肪乳劑救治大鼠布比卡中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性的主要機(jī)制可能是“脂肪池機(jī)制”。
　　 第二部分、脂肪乳劑后處理對大鼠布比卡因部分藥代動力學(xué)影響和機(jī)制
　　 目的：觀察脂肪乳劑后處理對SD大鼠腦組織和血漿布比卡因濃度的影響,進(jìn)一步研究脂肪乳劑對大鼠布比卡因中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性影響的主要機(jī)制。
　　 方法：

7、　　 1.24只SD大鼠隨機(jī)分為四組:C1組為生理鹽水后處理取材組(n=6):C2組為生理鹽水后處理觀察組(n=6);D1組為脂肪乳劑后處理取材組(n=6);D2組為脂肪乳劑后處理觀察組(n=6)。
　　 2.大鼠七氟醚吸入麻醉下行氣管切開、氣管插管、機(jī)械通氣、頸動脈、股靜脈穿刺等。實驗過程記錄ECG、BP、MAP、HR。
　　 3.麻醉后15min,四組均用微量泵經(jīng)股靜脈輸注0.1%布比卡因2mg/kg,輸注時間為3

8、min,完畢后立即采血并分別給予后處理藥物。
　　 4.C1、C2兩組經(jīng)股靜脈微量泵輸注生理鹽水注射液;D1、D2組經(jīng)股靜脈微量泵輸注20%脂肪乳劑。兩組輸注速率均為3ml/kg/min,輸注時間為5min。
　　 5.C1、D1兩組均在布比卡因輸注完畢后的第0min、8min,從頸動脈抽取動脈血1.5 ml,保存于肝素化抗凝管中,而后立即斷頭處死大鼠取腦組織標(biāo)本。
　　 6.C2、D2兩組均在布比卡因輸注完畢后

9、的第0min、8min、25min、50min、75min時,分別從頸動脈抽取動脈血1.5 ml,而后立即斷頭處死大鼠取腦組織標(biāo)本。
　　 7.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:取受試動物混合血清1ml分別加入布比卡因系列標(biāo)準(zhǔn)液,使成0.0625mg/L、0.125mg/L、0.25mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、4mg/L的血清樣品,高效液相色譜分析測定布比卡因峰面積,以受試物峰面積對添加濃度作線性回歸。
　　 結(jié)果：

10、　　 1.峰面積與血漿布比卡因濃度在0.0625mg/L～4mg/L范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,Y=0.0000359 X+0.00938(r=0.999,n=5)。
　　 2.血漿布比卡因濃度:脂肪乳劑后處理取材組(D1組)第8min時為15.09±0.45mg/L,生理鹽水后處理取材組(C1組)為5.19±0.41mg/L,兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。脂肪乳劑后處理觀察組(D2組)血漿布比卡因濃度分別為:0min

11、6.93±0.55mg/L、8min15.18±0.38mg/L、25min7.41±0.41mg/L、50min4.32±0.28mg/L、75min2.13±0.13mg/L,生理鹽水后處理觀察組(C2組)分別為:Omin6.95±0.53mg/L、8min5.2±0.45mg/L、25min2.57±0.09mg/L、50min1.50±0.09mg/L、75min1.04±0.17mg/L,在相同時間點,除0min峰濃度外,脂肪

12、乳劑后處理觀察組(D2組)血漿布比卡因濃度,均高于生理鹽水后處理觀察組(C2組),兩組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3.腦組織布比卡因濃度:生理鹽水后處理取材組(C1組,2.37±0.052μg/g),高于脂肪乳劑后處理取材組(D1組,1.39±0.499μg/g),兩組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);生理鹽水后處理觀察組(C2組,0.320±0.035μg/g)高于脂肪乳劑后處理觀察組(D2組,0.