兔PRF、A-PRF的制備及部分生長(zhǎng)因子濃度測(cè)定.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)人、兔血液流變學(xué)部分指標(biāo)對(duì)比分析，篩選制備兔富血小板纖維蛋白（Platelet-rich fibrin，PRF）和改良型富血小板纖維蛋白（Advanced platelet-rich fibrin，A-PRF）凝膠的方法，研究兔標(biāo)準(zhǔn)PRF和A-PRF的體外部分生長(zhǎng)因子釋放規(guī)律，為后續(xù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究提供數(shù)據(jù)參考。
　　方法：采集12名健康志愿者（男女各6人）肘靜脈全血、12只健康日本大耳兔（雌雄各6只）耳中動(dòng)脈全血各

2、5ml，進(jìn)行血液流變學(xué)指標(biāo)統(tǒng)計(jì)分析。選擇17種離心方法制備兔PRF凝膠，16種離心方法制備兔A-PRF凝膠，通過(guò)光鏡、掃描電鏡觀察，與人體標(biāo)準(zhǔn)方法制備的PRF、A-PRF對(duì)比分析，篩選與人PRF、A-PRF鏡下微觀結(jié)構(gòu)最接近的兔PRF、A-PRF制備方法；用篩選的最佳制備方法制備兔PRF、A-PRF，進(jìn)行體外靜置，觀察在20min，1h，4h，1d，3d，5d，7d，14d，21d，28d10個(gè)時(shí)間點(diǎn)有促進(jìn)軟硬組織再生作用的生長(zhǎng)因子IL

3、-1，IL-4，PDGF，TGF-β1，TNF-α， VEGF的釋放量。
　　結(jié)果：（1）兔血液在高、中、低三種剪變率下全血粘度，全血高切、低切還原粘度，全血高切、低切相對(duì)指數(shù)，紅細(xì)胞聚集指數(shù)均顯著低于人血液（P<0.05)，其余血液流變學(xué)指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（2）17種離心方法制備的兔PRF和16種離心方法制備的兔A-PRF,各組表現(xiàn)不一，凝塊結(jié)構(gòu)分層、活細(xì)胞數(shù)量范圍、纖維蛋白排列各不相同。其中3250 rpm/m

4、in,10min制備的兔PRF與人體PRF鏡下微觀組織學(xué)結(jié)構(gòu)最為接近；2000 rpm/min,24min制備的兔A-PRF與人體A-PRF鏡下微觀組織學(xué)結(jié)構(gòu)最為接近。（3）兔PRF和A-PRF體外靜置，實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)釋放的生長(zhǎng)因子中總含量最多的是PDGF，但兩組間無(wú)顯著差異。兔A-PRF組在7d、21d、28d釋放的生長(zhǎng)因子IL-1明顯高于PRF組，但兩組間整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)釋放的IL-1總蛋白含量沒(méi)有明顯差異。兔A-PRF組在3d、21d釋

5、放的生長(zhǎng)因子IL-4明顯高于PRF組，且實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)釋放IL-4總蛋白含量明顯高于PRF組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兔A-PRF組實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)釋放的生長(zhǎng)因子TGF-β1，TNF-α，VEGF總蛋白含量均高于PRF組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但兩組間在各個(gè)時(shí)間段釋放量均沒(méi)有明顯差異。
　　結(jié)論：兔血全血粘度、全血還原粘度、全血相對(duì)指數(shù)和紅細(xì)胞聚集指數(shù)顯著低于人血，其余血液流變學(xué)指標(biāo)無(wú)明顯差異。3250 rpm/min,10min制備的兔PRF與人體