基于SNP-MaP慢性乙型肝炎不同臨床轉(zhuǎn)歸全基因組關(guān)聯(lián)研究和乙型重型肝炎預(yù)后模型的構(gòu)建.pdf

1、第一部分
　　 目的：慢性乙型肝炎的臨床轉(zhuǎn)歸包括乙肝病毒攜帶者肝、硬化、肝癌、乙型重型肝炎，它是一組有明確病因的復(fù)雜多基因疾病，應(yīng)用SNP-MaP(snpmicroarray and pooling)完成全基因組掃描，尋找慢性乙型肝炎重癥化的易感位點(diǎn)，并擴(kuò)大樣本驗(yàn)證其易感性位點(diǎn)。
　　 方法：根據(jù)慢性乙型肝炎的臨床轉(zhuǎn)歸的表型將樣本分為乙肝病毒攜帶者，肝硬化，肝癌，乙型重型肝炎。應(yīng)用affymatrix SNP 6.0掃描

2、各組中100個(gè)樣本隨機(jī)挑選86個(gè)組成DNA pool，并完成3個(gè)生物學(xué)重復(fù)。分別運(yùn)用兩種不同的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析，挑選差異性最強(qiáng)的SNP 位點(diǎn)。在乙肝病毒攜帶者234例， 肝硬化300例，肝癌300例，乙型重型肝炎171例進(jìn)行個(gè)體驗(yàn)證。
　　 結(jié)果：通過嚴(yán)格的統(tǒng)計(jì)學(xué)挑選，一共挑選7個(gè) SNP 進(jìn)行個(gè)體的基因分型。 發(fā)現(xiàn)兩個(gè)與肝硬化易感性的多態(tài)性位點(diǎn)分別是轉(zhuǎn)錄因子 TBX5 SNP 位點(diǎn)rs3825214在于對(duì)照組相比(共顯性模型

3、P=0.024, 顯性模型P=0.008 OR1.8(1.1-2.9))和膜蛋白 SCUBE3 SNP 位點(diǎn) rs 3800385在于對(duì)照組相比(顯性模型 P=0.0076 OR 1.6(1.1-2.32)). 且SNP 位點(diǎn)rs3800385在肝癌在于對(duì)照組相比較的共顯性模型中具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：從分子流行病學(xué)的角度證明了TBX5和SCUBE3在肝硬化易感性中起重要作用。SCUBE3與肝癌的易感性相關(guān)。
　　

4、 第二部分
　　 目的：前瞻性隨訪乙型重型肝炎病人長(zhǎng)期預(yù)后，并對(duì)影響乙型重型肝炎長(zhǎng)期預(yù)的危險(xiǎn)因素進(jìn)行分析，從中篩選出對(duì)預(yù)后有明顯影響的因素，構(gòu)建預(yù)后模型并與現(xiàn)有的預(yù)后模型進(jìn)行對(duì)比其預(yù)后判斷效能，在一個(gè)獨(dú)立回顧性的樣本進(jìn)行驗(yàn)證，判斷對(duì)預(yù)后預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確性。
　　 方法：從2007年6月到2008年12月前瞻性從4個(gè)醫(yī)院進(jìn)行樣本收集254例乙型重型肝炎病人，同樣的時(shí)間段內(nèi)在回顧性中心收集乙型重型肝炎病例43例，記錄所有的臨床資料

5、對(duì)上述病人情況進(jìn)行隨訪。記錄所有的住院期間臨床資料。依據(jù)隨訪的結(jié)果，分析生化指標(biāo)和并發(fā)癥對(duì)死亡的影響，同時(shí)探討肝硬化重型肝炎程與非肝硬化重型肝炎臨床指標(biāo)的差異。應(yīng)用單因素分析和多元回歸模型，建立預(yù)后模型，運(yùn)用 ROC 曲線下面積比較本研究的模型與現(xiàn)有的重型肝炎預(yù)后模型預(yù)測(cè)能力。然后在回顧性的中心驗(yàn)證預(yù)后模型的預(yù)測(cè)效能。
　　 結(jié)果：前瞻性中心平均年齡為40.58（14-69）肝硬化比例為27.16％，男性比例為88.89％，而回

6、顧性中心平均年齡為43.3（20-66）肝硬化比例為27.9％，男性比例為90.7％。隨訪截止時(shí)間為2009年12月，平均隨訪時(shí)間為19.5（0-30）。總的生存率為34.68％，其中前瞻性中心的生存率為35.03％而回顧性的中心生存率為32.58％。分析發(fā)現(xiàn)生存組和死亡組中年齡、凝血酶原時(shí)間、凝血酶原活動(dòng)度、纖維蛋白原、總膽紅素、直接膽紅素、血清γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、乳酸脫氫酶、氯、肌酐、MELD 評(píng)分、肝硬化、脾大、自發(fā)性腹膜炎、腹水、肝

7、性腦病、肝腎綜合癥均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。而在肝硬化組和非肝硬化組中年齡、感染周數(shù)、凝血酶原時(shí)間、國(guó)際化標(biāo)準(zhǔn)比值、凝血酶原活動(dòng)度、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、膽固醇、肌酐、尿酸、HBV-DNA、MELD 評(píng)分、死亡率上均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），多因素回歸分析構(gòu)建預(yù)后模型 P=eX/1+eX, X=（4.542+0.671*國(guó)際化標(biāo)準(zhǔn)比值+0.003*總膽紅素mmol/L+0.034*肌酐mmol/L-0.025*氯mmol/L

8、+0.445*肝硬化），在ROC 曲線下面積比較，本研究模型ROC 面積較MELD 評(píng)分系統(tǒng), Dhiman 模型，Sun 模型及西安標(biāo)準(zhǔn)曲線下面積顯著性大于（P＜0.05）,依次為(0.80, CI 95％ 0.75-0.86)，MELD (0.73, CI 95％ 0.67-0.8), Sun (0.71, CI95％ 0.64-0.779)，Dhiman 模型(0.66, CI 95％ 0.61-0.71), 西安標(biāo)準(zhǔn)（0.58,