2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、乙醛酸是醛酸家族中分子量最小的物質(zhì),具有一系列化學反應(yīng)特性,被廣泛用于人造香料、藥品制造和農(nóng)藥制造等領(lǐng)域。目前,乙醛酸主要由化學法合成,本論文對其生物法合成進行了研究。
  利用Red基因重組敲除法,把大腸桿菌中乙醛酸代謝相關(guān)的基因敲除,包括編碼蘋果酸合酶的glcB和aceB基因、編碼乙醛酸還原酶的ycdW基因和編碼羥基丙二酸半醛合酶的gcl基因?;蚯贸?,將木糖合成乙醇酸的代詡途徑引入細胞內(nèi),發(fā)現(xiàn)隨著基因敲除的增多,細胞生長受

2、到的影響變大,細胞生長變得緩慢,而木糖的消耗也減緩。敲除glcB、aceB和gcl基因的Xg4GA菌株培養(yǎng)48h后,5g/L的木糖消耗殆盡,乙醇酸積累到1.58g/L,乙醛酸產(chǎn)量達0.13g/L。
  在此基礎(chǔ)上,在Xg4GA菌株中過表達乙醇酸氧化酶基因簇glcDEF,增強細菌的乙醇酸氧化能力,使得乙醛酸的產(chǎn)量提高至0.56g/L,但是細菌的生長變差。由于乙醇酸氧化酶是一種過氧化物黃素蛋白,乙醇酸氧化過程中產(chǎn)生H2O2,積累的H2

3、O2無法及時被大腸桿菌自身的過氧化氫酶消耗,抑制菌體的生長,使得生物量下降。
  進一步過表達過氧化物酶基因katE,加快細胞內(nèi)H2O2的分解,減輕其對細胞的毒性和乙醇酸氧化酶的抑制?;騥atE的過表達使得H2O2的濃度降低,細菌的生物量提高,乙醛酸的產(chǎn)量提高了36.15%,達到0.74g/L,為目前生物發(fā)酵法的最高產(chǎn)量。
  由于乙醛酸具有毒性,濃度過高會影響細胞的生長,進一步研究了無細胞體系的體外酶法合成乙醛酸,目前已

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