肽鏈內(nèi)切酶對青貯苜蓿蛋白降解的作用機(jī)理.pdf

1、苜蓿(MedicagosativaL.)青貯是保持其青綠特性和解決苜蓿在調(diào)制干草時造所成損失的有效措施。但是苜蓿在制作青貯飼料的過程中，由于自身植物蛋白酶和微生物等因素，使大量真蛋白水解成為不利于家畜吸收的非蛋白氮(non-proteinnitrogen，NPN)大大減少了苜蓿青貯飼料的營養(yǎng)價值和利用效率。
　　 本文對苜蓿中所含肽鏈內(nèi)切酶的種類進(jìn)行了研究，以綠汁發(fā)酵液模擬青貯發(fā)酵過程，探討了苜蓿中肽鏈內(nèi)切酶的特性及其在苜蓿青貯

2、過程中對蛋白的降解作用。在制作苜蓿綠汁發(fā)酵液前通過添加各種肽鏈內(nèi)切酶的抑制劑，并設(shè)置對照組來分析不同肽鏈內(nèi)切酶在形成非蛋白各組分過程中的作用。試驗(yàn)結(jié)果表明：
　　 1、苜蓿中含有絲氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶等四種肽鏈內(nèi)切酶；
　　 2、完全抑制各種肽鏈內(nèi)切酶活性的抑制劑濃度分別為：絲氨酸蛋白酶---5mM的PMSF；天冬氨酸蛋白酶---0.1mM的PeptatinA；金屬蛋白酶---5mM的1

3、，10-phenantroline；半胱氨酸蛋白酶---0.1mM的E-64；且苜蓿中絲氨酸蛋白酶的最適溫度為45℃，最適pH值為6.6；
　　 3、氨態(tài)氮(NH3-N)的形成過程中，金屬蛋白酶起到了主要作用，而半胱氨酸蛋白酶的作用甚微；金屬蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶在游離氨基酸的形成過程中起主要作用，絲氨酸蛋白酶次之；天冬氨酸蛋白酶在氨態(tài)氮和游離氨基酸的形成過程中，貢獻(xiàn)率最?。辉趯⒌鞍姿獬呻牡倪^程中，天冬氨酸蛋白酶和半胱氨酸蛋