2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、銅綠假單胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)和大腸桿菌(Escherichia coli)廣泛的存在于日常生活環(huán)境中,是食品和醫(yī)院中常見的致病菌,并且對β-內(nèi)酰胺類抗生素產(chǎn)生的耐藥性給人類健康和醫(yī)學(xué)發(fā)展帶來極大挑戰(zhàn)。銅綠假單胞菌青霉素結(jié)合蛋白PBP3和大腸桿菌青霉素結(jié)合蛋白PBP1b、PBP4、PBP5在細(xì)胞壁的合成、細(xì)菌的生長繁殖以及維持細(xì)胞形態(tài)上發(fā)揮著重要作用。本課題以這4種PBPs為靶點(diǎn),通過分子對接和虛擬篩選技術(shù)

2、,找出不僅能夠有效抑制細(xì)菌生長,而且結(jié)構(gòu)上不具有β-內(nèi)酰胺環(huán)的先導(dǎo)化合物,為解決細(xì)菌的耐藥性問題提供一定幫助,同時將這種作用于細(xì)菌細(xì)胞壁發(fā)揮抗菌作用的先導(dǎo)化合物作為一種食品保鮮劑,針對冷卻肉在貯藏期間的保鮮效果進(jìn)行了研究。
  本論文的主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下:
  1.選擇DOCK6.5軟件,將ZINC數(shù)據(jù)庫內(nèi)儲存的所有化合物作為分子對接的配體,調(diào)整構(gòu)象后分別投射入受體蛋白P.AeruginosaPBP3以及E.coli P

3、BP1b、PBP4和PBP5的活性口袋處,進(jìn)行相互作用能的計算。第一輪Grid score打分后將分值低于-30 kal/mol的配體選入第二輪篩選,然后經(jīng)Amber score打分后挑選出分值低于-20kal/mol的配體化合物,對這些化合物綜合情況進(jìn)行分析后挑選出編號為ZINC00053282的先導(dǎo)化合物。
  2.根據(jù)虛擬篩選的結(jié)果,以2,4,6-三氯-1,3,5-均三嗪(三聚氯氰,TCT)為原料,通過取代反應(yīng)依次脫下三個氯

4、原子,分別以N-N二異丙基乙胺(DIPEA)和氫氧化鈉(NaOH)為縛酸劑,在不同的條件下接上哌啶基和兩個甘氨酸分子,最終合成先導(dǎo)化合物2,4-二氯-6-哌啶基-1,3,5-均三嗪,經(jīng)硅膠柱純化后用核磁和質(zhì)譜驗(yàn)證化合物結(jié)構(gòu)正確。
  3.使用肉湯稀釋法測定合成的先導(dǎo)化合物的抑菌活性,以銅綠假單胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)、大腸桿菌(Escherichia coli、單增李斯特菌(Listeria monoc

5、ytogenes)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)5種菌為供試菌測定最小抑菌濃度。結(jié)果顯示其對P.Aeruginosa、E.coli、B.subtilis、L.monocytogenes以及S.aureus的MIC分別200、175、225、225和250μg/mL,證明對革蘭氏陽性和陰性菌均有抑菌活性,效果比茶多酚(800-1600μg/mL)這種食品中常

6、用的保鮮劑更好,但不如強(qiáng)效抗菌劑氨芐青霉素鈉(12.5μg/mL)。
  4.分別測定先導(dǎo)化合物作用下,冷卻肉在貯藏期間的色差、菌落總數(shù)、pH值、揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)及汁液流失率和顏色變化這5個指標(biāo),并設(shè)置山梨酸鉀作對照組,檢測先導(dǎo)化合物的保鮮效果。結(jié)果顯示在這5項(xiàng)指標(biāo)上先導(dǎo)化合物均與空白對照組有顯著差異(P<0.05),與山梨酸鉀組相比,先導(dǎo)化合物組在控制pH值增加、降低汁液流失率、減緩TVB-N值上升和抑制細(xì)菌生長這4項(xiàng)

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